Modelos teóricos de interacción de sustrato y poliaminas con acetilcolinesterasa

VENTURINO A; ROSENBAUM E; PECHEN DE D'ANGELO A.M; BERGOC R.M.

Villa Carlos Paz

Congreso; XXIX Reunión Anual de la SAIB; 1993

SAIB

Acetilcolinesterasa ( ChE) es una enZIma que presenta inhibición por sustrato, sugiréndose que tiene un sitio activo doble con un sub-sitio catalítico y otro que uniría el extremo cargado de la acetilcolina. En condiciones de alta concentración de sustrato, se unirían 2 moléculas del mismo, una a cada sitio llevando a un complejo ternario de actividad menor o nula.  Estudiamos el efecto de poliaminas (P) sobre la actividad AChE de la enzima de órgano eléctrico de anguila, empleando acetiltiocolina como sustrato (S). Se desarrollaron modelos para 2 sitios de unión de S, uno catalitico (Se) y uno inhibitorio (Si) y para P,  partiendo de las ecuaciones de equilibrio para cada complejo posible. Bajo determinadas condiciones el modelo puede reducirse a otro más simple. A partir del ajuste de datos por regresión no lineal se determinaron las constantes de disociación, el grado de interacción entre sitios y el efecto de cada modulador sobre Vmax app. La interacción entre ambos sitios para S indica una caida de la afinidad de 9,34 con velocidad de catálisis del complejo EScSi = 0,17 Vmax. La interacción E seria excluyente con Si, requiriendo la unión previa de Sc para posibilitar la unión del complejo cuaternario. La energía de disociación del complejo E.P cae logaritmicamente con el número de grupos amino en P mientras que la energía de interacción entre el sitio de unión para P y Sc aumenta. La Vmax. app. para el complejo E.Sc.P aumenta 1.2 veces para las distintas P, ras que el complejo cuaternario carece de actividad.   Actualmente estamos desarrollando modelos para dos sitios de unión de P, que se ajusten mejor a los resultados experimentales