Modelo de interacción entre acetilcolinesterasa y su sustrato

VENTURINO A; ROSENBAUM E; PECHEN DE D'ANGELO A.M.; BERGOC R.M.

Villa Giardino

Congreso; XXXI Reunión Anual de la SAIB; 1995

SAIB

Acetllcolinesterasa (AChE) es una típica hidrolasa que presenta inhibición por sustrato. Tradicionalmente es ' analizada su cinética como un proceso en dos etapas en los que la enzima es prImero acetilada por el sustrato y luego se hidroliza el acetil-enzima formado en la primer etapa. De acuerdo a este modelo, la inhibición por sustrato se produce por             unión de este a la enzima acetilada .inhibiéndose lahdr6lisis por efecto estérico. Nosotros proponemos un modelo sin restricciones para la unión del sustrato al sitio catalítico y al sitio inhibitorio de la enzima y 1o ajustamos a resultados experimentales obtenidos con AChE de órgano eléctrico de anguila. Las medidas de actividad se efectuaron por el método de Ellman descontando la hidrólisis espontánea del sustrato midiéndola en ausencia de al enzima. Se ajustaron los distintos modelos a los resultados  experimentales por el algoritmo de Gauss - Newton, usando un            programa de regresión no lineal y probando el ajuste obtenido de acuerdo al criterio de Akaike.  De.los resultados' obtenidos se deducen las siguientes conclusiones: 1) Al menos una de las etapas cataUticas presenta inhibición por sustrato.  2) La inhibici6n por sustrato no es total.  3) En exceso de sustrato, en estado estacionario, la especie más abundante es el complejo temario formado por la enzima con los sitios para sustrato ocupados ES2; De esta forma. es la primer etapa de la catálisis la afectada por  la inhibici6n por sustrato.          4) La segunda etapa procede más rápidamente que la primera 1o que lleva a que se acumule como máximo, un 20 % de la enzima total en la forma de enzima acetilada.  5)  No es válido el supuesto de que la inhibición por sustrato pueda despreciarse a bajas concentraciones del mismo.