El pesticida clorpirifos induce fosforilación de Gsk-3β y translocación nuclear de β-catenina en células de adenicarcinoma mamario humano. Consecuencias sobre la capacidad invasiva celular

VENTURA, C; PONTILLO C.; MIRET, N.; RANDI, A; VENTURINO A; RIVERA, E; COCCA, C; NÚÑEZ, M

Buenos Aires

Jornada; XXIX Jornadas Multidisciplinarias de Oncología del Instituto ?Ángel H. Roffo?; 2013

Instituto Ángel H. Roffo

El cáncer de mama es la neoplasia más frecuente en mujeres de todo el mundo y la principal causa de muerte por cáncer en ellas. Uno de los factores más importantes en la evolución del cáncer de mama es la aparición de metástasis.  El clorpirifos (CPF) es un plaguicida organofosforado altamente utilizado en nuestro país y en el mundo. Previamente hemos demostrado que el CPF en bajas concentraciones (0,05μM) induce la proliferación de las células MCF-7 en forma dependiente del receptor de estrógeno alfa.  El objetivo de este trabajo es estudiar los procesos de invasión y migración celular en cultivos de células derivadas de adenocarcinomas mamarios humanos expuestos a diferentes concentraciones de Clorpirifos.  Se utilizaron las líneas celulares MCF-7 y MDA-MB-231. Las concentraciones de CPF empleadas variaron entre 0,05 y 50 µM. La migración celular se evaluó mediante el ensayo de cicatrización de la herida en monocapa. La actividad de metaloproteasas fue determinada en sobrenadantes de cultivos de células por zimografía. La invasión celular fue evaluada por la técnica de matrigel, utilizando suero fetal bobino como quimioatractante. La expresión y localización de proteínas involucradas en la transición epitelio mesenquimática fue evaluada por inmunofluorescencia. La fosforilación de Gsk-3β fue evaluada por Western Blot.  La exposición de las células MDA-MB-231 a CPF 0,5 µM incrementó significativamente su capacidad migratoria respecto a las células expuestas al vehículo (66%, p<0,05), esto fue acompañado por aumento del 20% en la actividad de las metaloproteasas 2 y 9 (p<0,01 respecto al control). El incremento de la migración celular fue revertido utilizando el inhibidor de la onco-proteína c-Src, PP2. La exposición de las células MCF-7 a CPF 50 µM modificó la capacidad invasiva de estas células (67% respecto al control, p<0,05), lo cual fue revertido por el agregado de PP2. Estos resultados fueron acompañados por la translocación desde la membrana citoplasmática hacia el núcleo de proteína β-catenina y el incremento en la fosforilación de la proteína Gsk-3β.   Estos resultados indican que el CPF en baja concentración (0,05 µM) induce un aumento en la migración celular en la línea MDA-MB-231, acompañado con un incremento en la actividad de las metaloproteasas MMP-2 y MMP-9. Por otra parte, en la línea celular MCF-7, el CPF induce la invasión celular, lo cual podría estar relacionado con la expresión nuclear de β-catenina y la fosforilación de Gsk-3β observadas en las células  expuestas al tóxico.