Desarrollo de herramientas de biología sintética y su aplicación para la obtención de proteínas quiméricas conteniendo múltiples epitopes

MARTIN POLITI; CLAUDIA ELENA; HUGO MENZELLA

Congreso; XV Congreso y XXXIII Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2013

En los últimos años el número de proteínas recombinantes producidas para uso terapéutico y/o diagnóstico se ha incrementado notablemente. En el presente trabajo se propone el desarrollo de una plataforma tecnológica que permita el rápido ensamblado y producción de proteínas quiméricas utilizando fragmentos de ADN sintético. Su aplicación permitirá obtener librerías de proteínas que no existen en la naturaleza conteniendo epítopes de distintos antígenos, pertenecientes en este caso al agente infeccioso Trypanosoma cruzi, combinados en un solo polipéptido. Para la expresión de los genes quiméricos se trabajó en Escherichia coli a fin de aprovechar la amplia variedad de herramientas para la expresión de genes heterólogos que ofrece este microorganismo. Para esto, se utilizaron ocho epítopes individuales de T. cruzi combinados en forma de matriz a fin de obtener todos los pares posibles. Estos epítopes fueron seleccionados en base a dos criterios: (i) su utilización en kits comerciales actualmente en el mercado y (ii) su capacidad para reaccionar con paneles de sueros positivos de acuerdo a lo reportado en la literatura