Nuevos genes implicados en la resistencia a péptidos microbicidas en Salmonella enterica

JULIETA BARCHIESI; MARTÍN ESPARIZ; FERNANDO C. SONCINI

Rosario, Santa Fe, Argentina.

Congreso; XXIII Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario.; 2003

Sociedad de Biología de Rosario.

La producción de péptidos microbicidas es una estrategia de defensa utilizada por diversas especies contra microorganismos patógenos. Sin embargo, ciertas bacterias parecen haber coevolucionado con sus hospedadores y adquirieron mecanismos de resistencia a tales péptidos. Tal es el caso de Salmonella enterica serovar Typhimurium, para la cual dicha resistencia es esencial para colonizar los tejidos del hospedador infectado. En esta bacteria patógena se han identificado dos sistemas regulatorios involucrados en resistencia a péptidos microbicidas: PhoP/PhoQ, y PmrA/PmrB. Estos sistemas regulan modificaciones en el LPS que le confieren a la bacteria una mayor resistencia  frente a péptidos catiónicos. Además, se identificaron tres loci independientes de estos sistemas regulatorios que afectan la resistencia a determinados péptidos catiónicos. En este trabajo se pretende ampliar el conocimiento de las herramientas utilizadas por parte de bacterias patógenas durante el proceso infeccioso para colonizar y evadir los mecanismos de defensa del hospedador infectado. Para tal fin se realizó el análisis genético de un operón que aumenta la resistencia bacteriana a péptidos microbicidas como protamina y cecropina P1. Mutantes insercionales en este operón no mostraron recuento de colonias en hígado de ratones C3H/HeN. Además, mostraron ser 10 veces menos eficientes en la internalizacion  a macrófagos respecto a la cepa salvaje. Estas mutantes fueron capaces de replicarse en macrófagos, indicando que la resistencia a péptidos microbicidas no está asociada a la supervivencia en dichas células. Sorprendentemente, las mutantes presentaron swarming defectivo y resultaron ser más resistentes a polimixina B que la cepa salvaje, lo cual es comparable a una cepa con expresión constitutiva de PmrA. A su vez, el perfil de LPS de ambas es similar. Sin embargo, su expresión es independiente tanto de PmrA/PmrB como de PhoP/PhoQ. La expresión en trans de los genes del operón salvaje en las cepas mutantes permitió revertir el fenotipo protamina sensible y swarming defectivo. Estos resultados sugieren que los genes del operón en estudio en Salmonella poseen un rol importante en las primeras etapas del proceso infectivo.