EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE β-1,4- ENDOXILANASA EN MEDIO DE CULTIVO SUPLEMENTADO CON BAGAZO

BARCHUK, MÓNICA L.; COLL CEPURBEDA, PEDRO A.; FONSECA, MARÍA I.; VILLALBA LAURA L.; ZAPATA, PEDRO D.

Jornada; IX Jornadas Cientifico - Tecnologicas FCEQyN-UNaM; 2015

La biomasa lignocelulósica es la principal fuente de azúcares para la producción debioetanol. Actualmente se buscan fuentes alternativas como ser los residuos de laagricultura y de la industria forestal, a fin de disminuir el costo de producción de estecombustible y la acumulación de estos materiales. En este sentido de la molienda yextracción del jugo de la caña de azúcar resulta un residuo fibroso, conocido como'bagazo', que se convierte en una opción para la producción de este tipo de tecnologíasamigables con el medioambiente. Una de las etapas para la producción de etanol a partirde bagazo requiere de la hidrólisis del hemicelulosa que se da gracias a la acción de uncomplejo enzimático dentro de las que se destaca la β-1,4- endoxilanasa y a pesar de queen la naturaleza existen numerosos microorganismos que producen altos niveles de estaenzima, los costos para su aplicación a escala industrial son muy elevados.Por esto el grupo de trabajo se plantea seleccionar cepas de Trichoderma sp. nativasde la provincia de Misiones promisorias para la producción de β-1,4- endoxilanasa enmedio de cultivo suplementado con bagazo de caña de azúcar como fuente de carbonoalternativa al xilano.Para ello se evaluaron 3 concentraciones de bagazo (5, 10 y 15 g/L) en medioMandels, se tomaron muestras cada 72 horas y se determinó la actividad xilanolitica pormedio de la técnica del DNS y se cuantificó azúcares reductores en espectrofotómetro a540 nm. Para la detección de isoenzimas se realizaron geles de poliacrilamida nodesnaturalizantes al 7,5% (p/v) se sembraron 8000 U/L en cada carril y reveló la actividadenzimática después de una incubación con buffer acetato de sodio 50mM pH 4,8 a 50ºCpor una hora con rojo Congo 0,1% (p/v) y se lavó posteriormente con NaCl 0,1M hasta laaparición de las bandas.Como resultado se obtuvo que dos cepas mostraron igual actividad (P