Obtención de fragmentos génicos de enzimas celulolíticas en cepas de Trichoderma sp. aislados de la provincia de Misiones

CASTRILLO ML, AMERIO N, FONSECA MI, ZAPATA PD, VILLALBA, LL.

Congreso; XLI CONGRESO Argentino de Genética; 2012

La bioconversión de celulosa a etanol a través de las enzimas celulasas ha surgido como unaalternativa potencial para reducir el uso de combustibles fósiles y la polución ambiental, pero elalto costo de producción ha obstaculizado su aplicación industrial. Un posible camino esprofundizar los conocimientos sobre las características bioquímicas y moleculares de los sistemasenzimáticos de microorganimos productores de celulasas para favorecer el empleo de diferentesestrategias biotecnológicas como sobreexpresión del gen, clonado, expresión heteróloga, etc. Eneste sentido los hongos del género Trichoderma secretan un conjunto de enzimas celulasas queactúan sinérgicamente para hidrolizar la celulosa. Dentro de tales enzimas, las celobiohidrolasas(CBH) son las más abundantes del conjunto.Nuestro objetivo fue obtener un fragmento génico de la enzima celobiohidrolasa I mediantecebadores degenerados a partir de Trichoderma spp.Se diseñaron cebadores degenerados sobre regiones conservadas en base a secuencias proteicas yconocidas de CBHI en ascomicetes. Luego de la amplificación los fragmentos génicos fueronpurificados y secuenciados.La secuencia obtenida en Trichoderma sp. arrojó una identidad máxima del 95% con el gen decelobiohidrolasa (cbh1) de Trichoderma harzianum, por tanto nuestro fragmento pudoreconocerse como un nuevo miembro de las celobiohidrolasas.