DETERMINACIÓN DEL EFECTO INDUCTOR DEL SULFATO DE COBRE SOBRE LA PRODUCCIÓN DE LA ENZIMA LACASA EN PLEUROTUS SAJOR-CAJU

TEJERINA, MARCOS R.; RAMOS A. B.; FONSECA, MARÍA I

Posadas

Jornada; VII Jornadas de Ciencia y Tecnología de la Facultad de Ciencias Exactas Químicas y Naturales, UNaM.; 2009

Los hongos causantes de pudrición blanca son los únicos organismos capaces de degradar eficientemente la lignina. Este proceso se debe a que estos poseen un sistemaenzimático oxidativo que ataca la molécula de lignina. Las enzimas ligninolíticas másimportantes descritas hasta el momento son: manganeso peroxidasa, lignina peroxidasa,lacasa, las cuales existen en diferentes combinaciones. Estas enzimas pueden serreguladas por diversos factores, como los metales pesados entre los cuales se encuentrael cobre, cuya influencia sobre la producción de enzimas ligninolíticas ha sido estudiadaextensamente en diversas especies. Con la utilización de estos sistemas enzimáticos laindustria se ha favorecido con estos avances biotecnológicos logrando optimizar losprocesos tecnológicos con un menor impacto ambiental.  En este sentido el objetivo del presente trabajo fue detectar y cuantificar laproducción de lacasa inducida por sulfato de cobre (SOCu) y su efecto sobre elcrecimiento de Pleurotus sajor-caju. 4Las muestras fueron incubadas a 29ºC en 50 ml de medio extracto de malta 12,7g/l, extracto soluble de maíz 0,5 % con el agregado de 0,5mM, 1mM o sin SO4Cudurante 5, 7, 10 y 14 días. Cada día se separó el micelio para la determinación debiomasa y el sobrenadante para la  cuantificación proteica por medio del método deBradford, además se cuantificó la actividad lacasa por espectrofotometría a 469 nmusando como sustrato 2,6–dimetoxifenol y se caracterizó la enzima mediante geles depoliacrilamida desnaturalizantes y no desnaturalizantes. El análisis estadístico fuerealizado mediante el programa GraphPad Prism 4. El día 14 fue el de mayor crecimiento micelial; y el día 10 el de mayor actividadenzimática  para  todos los tratamientos ensayados, siendo esta ultima de 53 U/L  parael medio sin cobre, de 121 U/L para 0.5 mM y 68 U/L para 1 mM. Las diferencias fueronsignificativas (p<0,001) en los días 10 y 14 entre los tratamientos con y sin cobre,siendo mayor la actividad lacasa en los tratamientos con cobre. En los geles sedetectaron dos isoenzimas, una de 74kDa y de 163kDa. Estos resultados confirman la importancia de la presencia de metales como el cobreen la inducción enzimática por lo que es fundamental avanzar sobre el conocimiento de laregulación a nivel genético de la transcripción y la traducción de enzimas ligninolíticas.