DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA LACASA EN Pleurotus Sajor-Caju INDUCIDO POR SULFATO DE COBRE.

TEJERINA MR, RAMOS AB, FONSECA MI.

Rio Cuarto Córdoba

Jornada; Tercera Jornadas Nacionales de Estudiantes de la Biología.; 2009

&amp;amp;lt;!-- /* Font Definitions */ @font-face {font-family:SimSun; panose-1:2 1 6 0 3 1 1 1 1 1; mso-font-alt:&amp;amp;#23435;&amp;amp;#20307;; mso-font-charset:134; mso-generic-font-family:auto; mso-font-format:other; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:1 135135232 16 0 262144 0;} @font-face {font-family:"@SimSun"; panose-1:0 0 0 0 0 0 0 0 0 0; mso-font-charset:134; mso-generic-font-family:auto; mso-font-format:other; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:1 135135232 16 0 262144 0;} /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0pt; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:SimSun; mso-ansi-language:ES-AR; mso-fareast-language:ZH-CN;} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.85pt 85.05pt 70.85pt 85.05pt; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --&amp;amp;gt; Los hongos causantes de pudrición blanca son los únicos organismos capaces de degradar eficientemente la lignina. Este proceso se debe a que estos poseen un sistema enzimático oxidativo que ataca la molécula de lignina. Las enzimas ligninolíticas más importantes descritas hasta el momento son: manganeso peroxidasa, lignina peroxidasa, lacasa, las cuales existen en diferentes combinaciones. Estas enzimas pueden ser reguladas por diversos factores, como los metales pesados entre los cuales se encuentra el cobre, cuya influencia sobre la producción de enzimas ligninolíticas ha sido estudiada extensamente en diversas especies. Con la utilización de estos sistemas enzimáticos la industria se ha favorecido con estos avances biotecnológicos logrando optimizar los procesos tecnológicos con un menor impacto ambiental. En este sentido, el objetivo del presente trabajo fue detectar y cuantificar la producción de lacasa inducida por sulfato de cobre (SO4Cu y su efecto sobre el crecimiento de Pleurotus sajor-caju. El hongo fue crecido a 29ºC en 50 ml de medio extracto de malta 12,7 g/l, extracto soluble de maíz 0,5 % con el agregado de 0,5 mM, 1 mM o sin SO4Cu durante 5, 7, 10 y 14 días. Cada día se separó el micelio para la determinación de biomasa y el sobrenadante para la  cuantificación proteica por medio del método de Bradford, además se cuantificó la actividad lacasa por espectrofotometría a 469 nm usando como sustrato 2,6–dimetoxifenol y se caracterizó la enzima mediante geles de poliacrilamida desnaturalizantes y no desnaturalizantes. El análisis estadístico fue realizado mediante el programa GraphPad Prism 4. El día de mayor crecimiento fue el 14 en todos los tratamientos ensayados. El día de mayor actividad enzimático  para  todos los tratamientos fue el 10mo,  siendo  53 U/L  para el medio sin cobre, 121 U/L para 0.5 mM y 68 U/L para 1 mM. Las diferencias fueron significativas (p<0,001) en los días 10 y 14 entre los tratamientos con y sin cobre, siendo mayor la actividad lacasa en los tratamientos con cobre. En los geles fueron observadas dos isoenzimas una de 74kDa y otra de mayor peso de 163kDa. Estos resultados confirman la importancia de la presencia de metales como el cobre en la inducción enzimática por lo que es fundamental avanzar sobre el conocimiento de la regulación a nivel genético de la transcripción y la traducción de enzimas ligninolíticas.