Identificación Molecular de Ilex paraguarienses e Ilex dumosa en yerba mate procesada.

GIORGIO EM; MM TISCORNIA,; MI FONSECA; PD ZAPATA

Tandil

Congreso; XXXVII Congreso Argentino de Genética; 2008

<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0pt; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:595.3pt 841.9pt; margin:70.85pt 85.05pt 70.85pt 85.05pt; mso-header-margin:35.4pt; mso-footer-margin:35.4pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> Ilex paraguariensis (Aquifoliaceae) también conocida como yerba mate es una planta importante desde el punto de vista económico en América del Sur. Se utiliza para preparar infusiones de peculiar sabor y propiedades estimulantes debido al contenido alto de la cafeína y teobromina. Existen evidencias que indican que las infusiones de I. dumosa podrían ofrecer algunas ventajas respecto a la de I. paraguarensis, principalmente un bajo o nulo contenido en cafeína y xantinas, siendo conveniente la elaboración de yerba compuesta con algún porcentaje de I. dumosa. El objetivo del presente trabajo es desarrollar un método molecular para la diferenciación entre ambas especies. La presencia de inhibidores en especies vegetales de alto contenido en compuesto fenólicos puede provocar ausencia de amplificación, siendo fundamental la optimización de métodos de extracción de ADN. En este sentido, se ensayaron diversos métodos para obtener ADN amplificable a partir de yerba mate elaborada utilizando hilo seco y nitrógeno líquido, variando el buffer de lisis celular (SDS 2%, CTAB 2%, SDS 1%/CTAB 1%) con o sin reprecipitación. Posteriormente, se amplificaron las muestras utilizando cebadores especie-específicos basados en las secuencias ITS (Internal Transcribed Spacer) y que fueron estandarizados con DNA obtenido a partir de hoja fresca de ambas especies. La selección del protocolo que será aplicado al material de estudio se seleccionó en función del rendimiento de la extracción, si calidad y la capacidad de ser amplificado. La variante metodológica que utiliza CTAB 2% para aislar DNA a partir de yerba mate elaborada permitió obtener fragmento esperado de 308pb para I. paraguarienses.