Mecanismos involucrados en la regulación por hormona tiroidea de la proliferación de las células de Sertoli

RIERA MF; GALARDO MN; PELLIZZARI EH; MERONI SB; CIGORRAGA SB

Mar del Plata

Congreso; LIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Se conoce que triiodotironina (T3) detiene la proliferación de CS inmadura por FSH. Este efecto estaría mediado por el incremento de los inhibidores del ciclo celular de la familia CIP/KIP, p21 y p27. Se desconoce si T3 es capaz de regular los niveles de expresión de los inhibidores del ciclo de la familia de INK4. Por otro lado si bien se ha observado en distintas líneas celulares que el mecanismo de acción de T3 involucra además de la interacción con receptores nucleares la activación de señales de transducción, tales mecanismos no han sido explorados en CS. El objetivo del trabajo fue determinar si en CS T3 regula la expresión del inhibidor del ciclo p19INK4d(p19), activa la kinasa activada por AMP (AMPK) y la vía de fosfatidilinositol-3-kinasa/proteína kinasa B (PI3K/PKB). Se incubaron por 48 hs cultivos de CS de 8 días de edad en condiciones basales o con 500nM T3 en ausencia o presencia de 100 ng/ml FSH. El análisis de los niveles de ARNm de p19 por Northern Blot reveló que T3 solamente incrementa el p19 en presencia de FSH (FSH+T3: 2.1±0.3* veces de estímulo vs FSH, X±DS, n=3, *p<0.05). Por otro lado, se incubaron cultivos de CS por 5, 15 y 30 minutos en ausencia o presencia de T3 500nM y se determinaron los niveles de fosforilación de AMPK y PKB por Western blot. Se observó que T3 incrementa los niveles de AMPK fosforilada mientras que disminuye los de PKB fosforilada. Observamos además que la incubación con el activador farmacológica de AMPK (AICAR 1mM) en presencia de FSH incrementa los niveles de expresión de p19 (AICAR+FSH: 2.4±0.6* veces de estímulo vs FSH, X±DS, n=3, *p<0.05) En conjunto estos Resultados sugieren que T3 en CS además de aumentar los inhibidores del ciclo de la familia CIP/KIP para detener la proliferación celular, incrementa con el mismo fin los niveles del inhibidor del ciclo celular p19INK4d probablemente a través de la activación de AMPK.