Análisis de la secreción de vesículas extracelulares en Mesocestoides corti

ANCAROLA, M.E.; MARCILLA, A; PONCINI, C; ROSENZVIT, M; CUCHER, M

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XXVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2015

Sociedad Argentina de Protozoología

Los cestodes son platelmintos que se transmiten pasivamente entre los hospederos que conforman sus ciclos de vida y logran parasitar a casi todos los vertebrados. Para estudiar el desarrollo y la supervivencia de los cestodes en sus hospederos nos centramos en los microRNAs (miRNAs) que son ARNs no codificantes de ~22 nts y poseen la capacidad de regular la expresión génica. Los miRNAs se han encontrado circulando en fluidos corporales protegidos en vesículas extracelulares (VEs) o en complejos protéicos. Recientemente, se ha reportado la presencia de miRNAs parasitarios en el torrente sanguíneo de sus hospederos, lo cual podría constituir un mecanismo de interacción parásito-hospedero o parásito-parásito.El objetivo del trabajo fue determinar la secreción de vesículas extracelulares y la presencia de miRNAs en su interior, en los cestodes Mesocestoides corti y Taenia crassiceps.A partir del cultivo in vitro de los estadios larvales de los parásitos se aisló la fracción correspondiente a las VEs. Se observó por microscopía electrónica de transmisión la presencia de vesículas con un rango de tamaños de 43-287 nm y de cuerpos multivesiculares de 104-416 nm. El contenido y la localización de ARN en las vesículas se estudiaron tratando a las muestras con proteinasa, ARNasa y SDS y analizándolas en Bioanalyzer. Se observó la presencia de ARNs pequeños (20-200 nt) en las muestras control y en las tratadas con proteinasa y ARNasa, mientras que no se halló ARN en las muestras tratadas con los tres reactivos. Por último, se evaluó la presencia de miRNAs por RT-PCR y se observaron productos de amplificación para los miRNAs Bantam y Let-7 en ambos parásitos.De este trabajo concluimos que los cestodes estudiados secretan VEs en su estadio larval con diversos tamaños y pueden presentarse en cuerpos multivesiculares. Al estudiar su composición, encontramos que contenían ARNs pequeños y en particular, miRNAs como Bantam y Let-7.