Los residuos superficiales de lisina modulan la transferencia colisional de ácidos grasos desde FABP de intestino hacia membranas.

GISELA FRANCHINI, BETINA CORSICO, JUDITH STORCH Y HORACIO A. GARDA

Tafí del Valle, Tucumán

Congreso; X X X Reunión anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2001

Sociedad Argentina de Biofísica

Se ha postulado que la transferencia de ácidos grasos (FA) desde FABP de intestino (IFABP) hacia membranas fosfolipídicas ocurre a través de un mecanismo colisional que involucra interacciones electrostáticas transitorias [Hsu, K. & Storch, J. (1996) J.Biol.Chem. 23, 13317-13323]. En particular, se ha sugerido que los fosfolípidos acídicos de membrana podrían interaccionar específicamente con residuos básicos en la superficie de IFABP. En este trabajo analizamos si los residuos de lisina de la superficie de ésta proteína están involucrados en el mecanismo de transferencia colisional. La IFABP se acetiló con la finalidad de neutralizar las cargas positivas de todos los residuos de lisina superficiales. Empleando un ensayo de transferencia de energía de resonancia hemos analizado velocidades y mecanismos de transferencia de antroiloxiderivados de ácidos grasos (AOFA) desde IFABP modificada químicamente por acetilación de los residuos de lisina, hacia membranas modelo en comparación con la proteína nativa (wIFABP). La transferencia desde la proteína acetilada hacia vesículas unilamelares pequeñas (SUV) fue un 50% más lenta que desde la proteína nativa. Además, mientras que la transferencia del AOFA es directamente proporcional a la concentración de SUV, la transferncia desde la proteína acetilada es independiente de la concentración de membranas aceptoras. Asimismo, el aumento en la densidad de carga negativa de las SUV resulta en un aumneto marcado de la velocidad de transferncia desde la proteína nativa, pero no modifica la velocidad de transferencia desde la acetilada. Los resutados de estos experimentos muestran la importancia de los residuos cargados positivamente en el mecanismo colisional de transferencia de FA hacia membranas, lo cual indicaría que las interacciones electrostáticas juegan un papel clave en el tráfico intracelular de FA.