Galectina-8 y su ligando CD166: interacciones en la progresión del carcinoma mamario

FERRAGUT, FÁTIMA; CÁRDENAS DELGADO, VICTOR M.; NUGNES, LORENA G.; BRAVO, ALICIA INÉS; NUÑEZ, MYRIAM; TRONCOSO, MARÍA F.; ESPELT, MARÍA V.; RABINOVICH, GABRIEL A.; WOLFENSTEIN-TODEL, CARLOTA; MALCHIODI, EMILIO L.; FERNÁNDEZ, MARISA M.; ELOLA, MARÍA TERESA

MAR DEL PLATA

Congreso; LIX Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2013

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

                   Las galectinas son lectinas que unen    beta-galactósidos capaces de descifrar información codificada en los glicanos de superficie celular y matriz extracelular. Galectina-8 (Gal-8) posee dos dominios de reconocimiento de carbohidratos en tandem. Recientemente, identificamos a CD166/ALCAM como ligando de Gal-8. Nuestros objetivos fueron: 1) analizar la localización subcelular de Gal-8 y de CD166 en diferentes estadios del carcinoma ductal mamario humano; 2) evaluar la localización de ambas moléculas en líneas celulares mamarias; 3) aislar CD166 endógeno de células tumorales mamarias y evaluar su interacción con Gal-8. En tejidos mamarios -mediante inmunohistoquímica-, Gal-8 presentó un descenso significativo (p<0,05) en la localización nuclear en las células epiteliales concomitante con aumento significativo (p<0,05) de la localización citoplasmática a lo largo de la progresión del carcinoma ductal. Respecto a la expresión de CD166 en células epiteliales de los tejidos, la localización superficial y citoplasmática se mantuvo constante conforme estos tumores progresan. En las líneas celulares, se encontró co-localización de Gal-8 y CD166 en el citoplasma, mediante inmunocitoquímica. Mediante inmunofluorescencia en células MDA-MB-231 no permeabilizadas e incubadas con Gal-8 exógena, dicha lectina se halló asociada a la superficie celular, co-localizando con CD166. CD166 de estas células fue purificado mediante cromatografía de afinidad en proteína A/anti-CD166. La interacción de CD166, tanto recombinante como endógeno, con Gal-8 se evaluó mediante resonancia magnética de superficie. Se detectó una interacción específica glicano-dependiente de Gal-8 tanto con CD166 hiperglicosilado comercial (KD=1,09 x 10-7 M, método cinético) como con CD166 endógeno (KD=4,2 x 10-6 M, método cinético). Concluyendo, Gal-8 y CD166 se expresan tanto en tejidos como en líneas celulares mamarios. Además, Gal-8 y CD166 endógeno interaccionan en forma directa glicano-dependiente.