Unión de galectina-1 esplénica porcina a neutrófilos humanos

CHIESA, M. E.; FINK, N. E.; ELOLA, M. T.; PISTACCIO, L.

Mar del Plata, Provincia de Buenos Aires, Argentina

Congreso; XLVII Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2002

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Se estudió la presencia de ligandos endógenos para la galectina-1 de bazo porcino  (SPG1) en neutrófilos (PMN) humanos en reposo y activados con fMLP (1 mM) y PMA (10 ng/ml), por citometrìa de flujo (CF) y por aglutinación (A). Para CF, se incubaron 2x106 PMN/ml con galectina-1 (0-10 µM) 30 min a ta, seguido de incubaciones sucesivas con anti-(SPG1) y anti-IgG de conejo-FITC y se analizaron en un citómetro Coulter EPICS-XL. Para A, 3x106 PMN/ml se incubaron con SPG1 (concentración final 0-10 mM). Se registró el grado de aglutinación y PMN libres por microscopía, para cada concentración. Los histogramas obtenidos por CF (n=3), muestran un incremento de la intensidad de fluorescencia siendo para concentraciones de SPG1 5 y 2,5 µM, 34 y 26% respectivamente, respecto a los controles (3 %) guardando una relaciòn dosis-respuesta. Estos resultados indican una interacción SPG1/PMN, parcialmente inhibible con lactosa (relación de positividad RP disminuye en 50-60%) confirmando asì la unión carbohidrato-dependiente; la activación de PMN triplicó la RP para ambos activadores. En los ensayos de aglutinación (n=3), se observó entre 16-1,7% de células libres respecto al control para el rango de 2,5-10 mM. Se confirma la presencia de ligandos totales para la SPG1 en la superficie del PMN humano, parcialmente inhibibles por lactosa, estando pendiente de dilucidar la identidad y función de dicho/s componentes de membrana.