INVESTIGADORES
ELOLA Maria Teresa
congresos y reuniones científicas
Título:
Galectina-1 como modulador del proceso de polarización de membranas de células de hepatocarcinoma humano.
Autor/es:
ESPELT, MARÍA; MANZI, MALENA; CARABIAS, PABLO; ELOLA, MARÍA; RABINOVICH, GABRIEL; WOLFENSTEIN-TODEL, CARLOTA; TRONCOSO, MARÍA
Lugar:
Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina
Reunión:
Congreso; LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica - LVII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología.; 2009
Institución organizadora:
Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica - Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología.
Resumen:
La galectina-1 (Gal-1), es una proteína con afinidad por âgalactósidos,
cuya participación en la función y fisio-patología del
hígado es un tema de estudio aún poco explorado. En el presente
trabajo se estudió el efecto de Gal-1 sobre la polarización de
células de carcinoma hepatocelular humano, HepG2, ya que adquieren
el fenotipo polarizado desarrollando canalículos biliares
(CB) entre células vecinas. Los CB se visualizaron por microscopía
de fluorescencia utilizando faloidina-TRITC. El número de células
se estimó utilizando el colorante nuclear Hoechst. La polarización
se estimó como CB/100 células. Las células fueron incubadas
con Gal-1 (7μM) o en medio control. A las 24h no se observaron
diferencias significativas en la polarización de las células
tratadas (9±0) con respecto al control (5±2). A las 48h, la Gal-
1 aumentó la polarización (15±1, p<0.05) con respecto al control
(9±1). La preincubación de Gal-1 con tiodigalactósido (10mM)
previno el aumento de la polarización (10±3). Cuando se evaluó
dicha polarización en presencia de wortmanina (1μM) y PD98059
(25μM), inhibidores de PI3K y MEK, respectivamente, ambos previnieron
el aumento de la polarización inducida por Gal-1 (7±3 y
6±3, respectivamente). Mediante inmunofluorescencia se identificaron
proteínas marcadoras de membrana apical: MDR1 y MRP2.
Ambas proteínas, involucradas en el transporte canalicular, tuvieron
la misma localización en células control y en tratadas con Gal-
1. Tampoco hubo diferencias al incubarlas con 5-clorometilfluoresceina
diacetato: en ambos casos el fluoróforo fue captado,
metabolizado y secretado a los CB vía MRP2 demostrando que
la Gal-1 no interfiere con su funcionalidad. Estos resultados demuestran
que Gal-1 acelera la polarización de células HepG2 en
forma dependiente del dominio de reconocimiento de
carbohidratos, vía PI3K/Akt y/o MEK/ERK1/2, sin interferir con la
estructura ni la integridad funcional canalicular, sugiriendo un
posible rol en la diferenciación hepática.