Expresión de galectina-8 y sus ligandos en tejido mamario humano

CÁRDENAS DELGADO, V.M.; ELOLA, M.T.; FRAHM, I.; TRONCOSO, M.F.; SALATINO, M.; RABINOVICH, G.; WOLFENSTEIN DE TODEL, C

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LIII Reunión Cientíica Anual de la Argentina de Investigación Clínica (SAIC), Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS); 2008

Las galectinas son lectinas caracterizadas por poseer secuencias de amino¨¢cidos consenso y al menos un dominio de reconocimiento de carbohidratos (DRC) con afinidad por ¦Â-galact¨®sidos. La galectina-8 (Gal-8) es un miembro de esta familia a¨²n poco explorado, que existe en varias isoformas bi- y mono-DRC, y que presenta localizaci¨®n citoplasm¨¢tica, nuclear y extracelular.  El objetivo general del presente trabajo es el estudio de la expresi¨®n de Gal-8 y sus ligandos en tejido mamario humano. Son nuestros objetivos espec¨ªficos: 1) Estudiar la expresi¨®n de Gal-8 en l¨ªneas celulares humanas de carcinoma mamario; 2) Identificar prote¨ªnas que se unen a Gal-8 en l¨ªneas de carcinoma mamario humano y 3) Evaluar la expresi¨®n de Gal-8 en tejidos humanos mamarios normales y tumorales. Los resultados demostraron que los extractos totales de c¨¦lulas T47D y MCF-7 de carcinoma mamario humano presentaron una banda de Gal-8 (36 kDa) en inmunoblotting revelado con un anticuerpo policlonal anti-Gal-8. Por otra parte, a los efectos de identificar prote¨ªnas que ligan Gal-8, la fracci¨®n de membranas de las c¨¦lulas T47D se someti¨® a cromatograf¨ªa de afinidad en AffiGel 10-Gal-8. El elu¨ªdo se analiz¨® en SDS-PAGE, y las bandas resultantes se digirieron in gel con tripsina y se sometieron a HPLC-espectrometr¨ªa de masa, identific¨¢ndose las siguientes prote¨ªnas ligandos: CD98h, CD36, CD71, CD82, CD107a/b, CD276 y ¦Â-actina. La presencia de ligandos para Gal-8 en la superficie de c¨¦lulas T47D fue tambi¨¦n confirmada por FACS. En estudios preliminares de inmunohistoqu¨ªmica, se encontr¨® Gal-8 en cortes histol¨®gicos de tejidos mamarios humanos normales y malignos. Se concluye que Gal-8 se expresa  tanto en l¨ªneas celulares de carcinomas mamarios como en tejidos mamarios humanos, y que varias prote¨ªnas se unen en forma espec¨ªfica a esta lectina en carcinomas mamarios, pudiendo alguna de ellas mediar procesos vinculados a la transformaci¨®n maligna o la met¨¢stasis.