Efecto de Galectina-1 en la quimiorresistencia y adhesión de células de carcinoma hepatocelular humano (HCC)

BACIGALUPO ML ; MANZI M; ESPELT MV; ELOLA MT; RABINOVICH GA; WOLFENSTEIN DE TODEL C; TRONCOSO MF

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LVI Reunión Científica Anual de la Argentina de Investigación Clínica (SAIC), Reunión de la Sociedad Argentina de Fisiología 2011, II Congreso Nacional AACYTAL, IV Reunión Científica Regional por el bienestar del Animal de Laboratorio y el Progreso de la; 2011

Previamente demostramos que Galectina-1 (Gal-1), proteína con afinidad por β-galactósidos, promueve la adhesión y la polarización de células de HCC, HepG2. En este trabajo, estudiamos la adhesión de otra línea de HCC humano, HuH7 en presencia de Gal-1 recombinante (rGal-1), mediante la tinción con cristal violeta.  rGal-1 soluble (3,5 y 14µM) disminuyó la adhesión a pocillos sin recubrir (80,8±3,8 y 66,4±4,6 %, p<0.01) respecto al control (100%), t=1h, mediante su dominio de unión a carbohidratos. En cambio, rGal-1 (14µM) promovió la adhesión cuando fue inmovilizada en los pocillos (137,8±3,2 %, p<0.05) y al ser incubada sobre pocillos recubiertos con la proteína de la matriz extracelular (MEC), laminina (218±12 % p<0.001). Si bien la expresión intracelular de Gal-1 fue menor en las células HuH7 que en las HepG2, se detectó en gran cantidad en el medio condicionado, indicando que la mayor parte de Gal-1 es secretada al medio extracelular, a diferencia de lo observado en las células HepG2 (Western blot, WB). Gal-1 aumentó la expresión del marcador apical MDR1 en la membrana plasmática (WB),  y dada su participación en la resistencia a diversas drogas quimioterápicas, como la camptotecina (CPT), analizamos la viabilidad de células HepG2 wt  y que sobre-expresan Gal-1 frente a dicho compuesto. Células que sobre-expresan Gal-1 fueron más resistentes a la muerte por CPT (1 y 10µM) (56,8±1,8 y 50,6±1,9 %) que las células wt (41,2±2,3 y 34,6±2 % p<0.05) (MTS). Nuestros resultados demuestran que Gal-1 modula la adhesión de células de HCC, ejerciendo un efecto diferencial según su “presentación” a la célula, su nivel de expresión y/o su localización celular. Proponemos que los hepatocitos tumorales secretan Gal-1, ésta permanece unida a la membrana plasmática o depositada en la MEC, favoreciendo la adhesión de las células tumorales a la misma, y a su diseminación. Además, Gal-1 contribuye a la resistencia a la muerte por CPT sugiriendo su participación en la quimiorresistencia.