EL ALGA PATAGÓNICA Enteromorpha sp. EXPRESA CALRETICULINA, LA MAYOR RETICULOPLASMASMINA LIGADORA DE CALCIO DE CÉLULAS EUCARIOTAS

ANDREA L. AMBROSIO; M. FERNANDA TRONCOSO; M. MERCEDES IGLESIAS; I. SÁNCHEZ; CARLOTA WOLFENSTEIN-TODEL

Ciudad de Mendoza

Congreso; XXXIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación en Bioquímica y Biología Molecular (SAIB).; 1998

La calreticulina es la proteína ligadora de calcio más importante de retículo endoplásmico de células eucariótas. Ha sido implicada en la regulación de una gran variedad de funciones celulares pero, sin embargo, no está claro cuál es su mecanismo de acción específico así como tampoco el por qué de su extremada conservación durante la evolución. Por estas razones resulta interesante investigar la existencia de calreticulina en organismos donde no ha sido previamente descripta, así como estudiar su estructura primaria para poder compararla con otras proteínas relacionadas. Utilizando un método que comprende varias centrifugaciones y ultracentrifugaciones, seguidas de solubilización por medio del agregado de desoxicolato de sodio y Cl2Hg, se obtuvo una fracción enriquecida en proteínas solubles de retículo endoplásmico. Al realizar un SDS-PAGE de esta fracción se obtuvieron cinco bandas principales de masa molecular aproximada de 66, 55, 50, 43 y 24 kDa. Para continuar con la purificación se sometió este material a FPLC en una columna Mono-Q y se obtuvo una fracción prácticamente pura, correspondiente a la proteína de masa molecular aproximada 66 kDa. Esta proteína resultó positiva en ensayos de Western blot utilizando anticuerpos anti-calreticulina de conejo. Además, también resultó positiva cuando el SDS-PAGE se tiñó con un colorante específico para proteínas ligadoras de calcio (“Stains all”). Estos experimentos estarían indicando la existencia de calreticulina, o de una proteína relacionada, en el alga Enteromorpha sp y es ésta la primera vez que se describe su presencia en algas.