Galectina-1 activa la vía de señalización Wnt/beta-catenina en células de carcinoma hepatocelular: Rol en la transición epitelio-mesenquimal

BACIGALUPO, MARÍA L.; MANZI, MALENA; CARABIAS, PABLO; ELOLA, MARÍA TERESA; RABINOVICH, GABRIEL A.; WOLFENSTEIN-TODEL, CARLOTA; TRONCOSO, MARÍA F.

MAR DEL PLATA

Congreso; LIX Reunión Científica Anual de la Sociedad Científica Argentina de Investigación Clínica; 2014

SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACION CLINICA

Galectina-1 (Gal1) es una proteína que une beta-galactósidos cuya expresión se encuentra aumentada en el carcinoma hepatocelular (CHC). En trabajos previos, demostramos que la sobreexpresión de Gal1 en células de CHC humano, HepG2, promueve el crecimiento tumoral, la presencia de metástasis en nódulos drenantes al tumor e induce la transición epitelio mesénquima (TEM, evento clave en la diseminación de las células tumorales). El objetivo de este trabajo fue evaluar la participación de la vía Wnt/ß-catenina, frecuentemente alterada en el CHC, en la inducción de la TEM mediada por Gal1. Las células HepG2 poseen una mutación heterocigota en el gen de ßcat (deleción del dominio regulatorio), que resulta en la coexpresión de las isoformas silvestre y truncada. Las células que sobreexpresan Gal1 (HepG2Gal1) expresan un 70±8% de la isoforma silvestre respecto al control (p<0,05 Western blot (WB)), mientras que no se observan diferencias en la forma truncada. Las células HepG2Gal1 exhiben mayor acumulación nuclear de ßcat (microscopia confocal), mayor actividad transcripcional de ßcat/TCF (p<0,05, ensayos con plásmidos reporteros TOP/FOP), y mayores niveles de expresión de los principales blancos de la vía Wnt, ciclina D1 y c-myc (122±2% y 139±9%, respectivamente p<0,05 WB). Akt fosforila a ßcat en el residuo Ser552 promoviendo la translocación nuclear de la misma; las células HepG2Gal1 presentan mayores niveles de pßcatS552(150±24% p<0,05 WB). La vía de PI3K/PDK1 fosforila y activa a Akt; las células HepG2Gal1 muestran mayores niveles de pAktT308(188±20% p<0,05 WB). Analizamos la expresión del marcador epitelial Ecad en presencia de Wortmanina (inhibidor de PI3K); esto previno completamente la disminución de Ecad observada en las células HepG2Gal1 en ausencia del inhibidor (108±5 vs 50±5 WB).  Concluimos que la sobreexpresión de Gal1 induce la TEM en las células HepG2 a través de un mecanismo que involucra la activación de la vía Wnt y la fosforilación de Akt dependiente de PI3K.