El silenciamiento de galectina-8 retrasa el crecimiento tumoral in vivo de células tumorales mamarias

BRACALENTE C; COLOMBO L; NUGNES L; FERRAGUT F; GENTILINI L; LADERACH D; TRONCOSO MF; WOLFENSTEIN-TODEL C; RABINOVICH G; COMPAGNO D; ELOLA MT

Mar del Plata

Congreso; LIX Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica-LXII Reunión Anual Sociedad Argentina de Inmunología; 2014

Galectina-8 (Gal-8) es una lectina con dominios de reconocimiento para -galactósidos, que ha sido descripta como proteína matricelular dado que es capaz de modular la adhesión celular. Además, se expresa diferencialmente entre tejidos normales y tumorales, siendo interesante su participación en la transformación neoplásica. En base a estos antecedentes, en este trabajo, se estudió la acción de Gal-8 en el crecimiento tumoral in vivo. Para ello se determinaron los niveles de expresión de Gal-8 en diferentes líneas celulares tumorales mamarias humanas, MDA-MB-231 (línea invasiva), T47D y MCF-7 (líneas no invasivas) por PCR en tiempo real. La expresión de Gal-8, aumentó 4 y 5 veces en las líneas celulares T47D y MDA-MB-231 respectivamente, vs la línea celular MCF-7. Se utilizó ciclofilina-A como gen de referencia. Posteriormente, se silenció Gal-8 en la línea MDA-MB-231, mediante la transducción con un vector lentiviral (LV) y evaluó la tumorigénesis. A fin de silenciar Gal-8, se construyó un vector LV portador de un pequeño RNA interferente (LV-shRNA), como así también un control no específico (LVshCont), los cuales fueron utilizados para transducir la línea MDA-MB-231. Se evaluó la expresión de Gal-8 por western blot y observó un 30% de disminución de la expresión en las células silenciadas (MDA-Down) vs el control transducido con el LV no específico (MDA-LVshCont) y sin transducir (MDA-MB-231). Para evaluar la tumorigénesis, se inocularon subcutáneamente 10 millones de células (MDA-Down, MDA-LVshCont y MDA-MB-231) con matrigel en ratones nude (n=4/grupo). Se observó un retraso en el crecimiento de los tumores inducidos por la línea silenciada (0/0/19/29 mm3) respecto de ambos controles (MDA-LVshCont: 593/17/83/466 mm3 y MDA-MB-231: 716/58/1504 mm3). Estos resultados muestran que la línea invasiva MDA-MB-231 presenta una elevada expresión de Gal-8 y que su silenciamiento está asociado a un retraso del crecimiento tumoral in vivo.