Galectina-8 y su ligando CD166: interacciones en la progresión del carcinoma mamario.

FERRAGUT F; CARDENAS DELGADO V; NUGNES LG; BRAVO AI; NUÑEZ M; TRONCOSO MF; ESPELT MV; RABINOVICH GA; WOLFENSTEIN DE TODEL C; MALCHIODI E; FERNANDEZ M; ELOLA MT

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Científica Anual de la Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2013

Las galectinas son lectinas que unen b-galactósidos con capacidad de descifrar información codificada en los glicanos de la superficie celular y de la matriz extracelular. Galectina-8 (Gal-8) posee dos dominios de reconocimiento de carbohidratos, conectados en ?tandem?. Recientemente, identificamos a CD166/ALCAM como un ligando de Gal-8. Nuestros objetivos fueron: 1) analizar la localización subcelular de Gal-8 y de CD166 en diferentes estadios del carcinoma ductal mamario humano; 2) evaluar la localización de ambas moléculas en líneas celulares mamarias; 3) aislar CD166 endógeno de células tumorales mamarias y evaluar su interacción con Gal-8. En tejidos mamarios -mediante inmunohistoquímica-, se observó que la localización subcelular de Gal-8 en células epiteliales presentó un descenso significativo (p<0,05) en la localización nuclear y un aumento de la localización citoplasmática a lo largo de la progresión del carcinoma ductal. Respecto a CD166 en células epiteliales, la localización en membrana y citoplasma se mantuvo constante conforme estos tumores progresan. En las líneas celulares estudiadas, se encontró co-localización de Gal-8 y CD166 en el citoplasma, mediante inmunocitoquímica. Mediante inmunofluorescencia de células MDA-MB-231 no permeabilizadas e incubadas con Gal-8 exógena, se detectó la presencia de dicha lectina asociada a la membrana, co-localizando con CD166. Se purificó CD166 de estas células mediante cromatografía de afinidad en proteína A-anti-CD166. La interacción de CD166, tanto recombinante como endógeno, con Gal-8 se evaluó mediante resonancia magnética de superficie. Se detectó una interacción específica glicano-dependiente de Gal-8 tanto con CD166 hiperglicosilado comercial (KD=1,09 x 10-7 M, método cinético) como con CD166 endógeno (KD=4,2 x 10-6 M, método cinético). Concluyendo, Gal-8 y CD166 se expresan tanto en tejidos como en líneas celulares mamarios. Además, Gal-8 y CD166 endógeno interaccionan en forma directa glicano-dependiente.