Los inhibidores de tripsina de la soja (SBTI) y de Peltophorum dubium (PDTI) causan apoptosis de las células Jurkat de leucemia humana

M. FERNANDA TRONCOSO; SILVIA LONGHI; LILIA RETEGUI; CARLOTA WOLFENSTEIN-TODEL; M. FERNANDA TRONCOSO; SILVIA LONGHI; LILIA RETEGUI; CARLOTA WOLFENSTEIN-TODEL

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; XLVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y LI Reunión de la Sociedad Argentina de Inmunología (SAI); 2003

  Los inhibidores de serina-proteinasas poseen efectos anti-inflamatorios, sobre la coagulación y la fibrinólisis, y algunos previenen o suprimen la transformación inducida por carcinógenos in vitro e in vivo. En nuestro laboratorio se describió que los inhibidores de tripsina de la soja y de las semillas de la leguminosa, Peltophorum dubium, inducen apoptosis de las células Nb2 de linfoma de rata. El objetivo actual fue evaluar el efecto de dichas proteínas sobre células Jurkat de leucemia humana. La viabilidad celular, determinada utilizando un “kit” comercial de proliferación celular indicó que al tratar las células con SBTI y PDTI 25 mM la viabilidad disminuyó un 40 ± 18 % (p<0.01) y 25 ± 13 % (p<0.05), respectivamente, con respecto a las células sin tratar. La hipodiploidía del ADN se analizó por tinción con yoduro de propidio y citometría de flujo, y se determinó que SBTI y PDTI 25 mM provocaron un aumento de 2 y 3 veces, respectivamente, en el porcentaje de núcleos hipodiploides. Por medio de tinción con Anexina V-FITC en combinación con yoduro de propidio, se observó que SBTI 25 mM aumentó al doble y al triple el porcentaje de células en apoptosis temprana y tardía, respectivamente, con respecto al control. En cambio, PDTI 25 mM sólo incrementó la apoptosis tardía al doble. La presencia de células necróticas se descartó por tinción diferencial con bromuro de etidio y naranja de acridina. La actividad de la caspasa-3, determinada fluorimétricamente, aumento de 19.4 ± 0.2 unidades de fluorescencia relativa para el control a 31.9 ± 4.3 (p<0.05) unidades en presencia de SBTI 25 mM, mientras que PDTI no causó diferencia significativa (p<0.05). Los resultados obtenidos sugieren que tanto SBTI como PDTI causan apoptosis de las células Jurkat, siendo SBTI el más potente.