PURIFICACIÓN DE UNA LECTINA LIGADORA DE CALCIO, CON AFINIDAD POR MANANO, A PARTIR DE PLACENTA OVINA.

TRONCOSO, MARÍA FERNANDA; AMBROSIO, ANDREA LAURA; IGLESIAS, MARÍA MERCEDES; WOLFENSTEIN-TODEL, CARLOTA.

Ciudad de Mendoza

Congreso; XXXIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación en Bioquímica y Biología Molecular (SAIB); 1998

Las lectinas son proteínas o glicoproteínas, de origen no inmune, que presentan la habilidad de unirse a carbohidratos de manera específica y reversible. Este trabajo describe la purificación de una lectina del tipo C (ligadora de Ca+2) a través de una cromatografía de afinidad en una columna de Fetuina-Agarosa, a partir de un homogeneizado de placenta ovina. Con el propósito de caracterizar esta lectina bioquímicamente se realizó una electroforesis en geles de poliacrilamida con SDS y se obtuvieron 3 bandas, de masas moleculares aproximadas de 64, 58 y 24 kDa respectivamente. Las bandas se electrotransfirieron a una membrana de nitrocelulosa y ésta se reveló con un anticuerpo policlonal específico anticalreticulina, de conejo siguiendo la técnica de Western blot. La banda de 58 kDa fue la única que dió reacción positiva. La actividad de la lectina se determinó mediante ensayos de hemaglutinación utilizando eritrocitos de conejo y el estudio de su especificidad se llevó a cabo a través de ensayos de inhibición de la hemaglutinación. Estos experimentos mostraron una gran afinidad de la lectina por manano, así como también por fetuina, siendo indispensable la presencia de Ca+2 para mantener la actividad lectínica. Otros carbohidratos ensayados tales como manosa, glucosa, fucosa, galactosa , lactosa y ácido siálico no resultaron inhibitorios. Estos resultados sugieren que  podría tratarse de calreticulina o una proteína relacionada