Inducción in Vitro de embriones somáticos en Arachis glabrata (Leguminosae): influencia del tiempo de exposición al Picloram

PABLO KLUSACEK; MARÍA LAURA VIDOZ; HEBE YOLANDA REY

Corrientes

Congreso; Reunión de Comunicaciones Científicas y Técnicas. FCA. UNNE.; 2011

Las especies silvestres de Arachis contienen genes útiles para el mejoramiento del maní cultivado y en particular, algunas accesiones de A. glabrata, contienen genes de resistencia a roya, viruela tardía y algunas enfermedades vírales. Arachis glabrata (2n = 4x = 40) es una especie forrajera, perenne y rizomatosa. Se destaca por su valor nutricional, persistencia y amplio espectro de usos. El desarrollo de sistemas in vitro que permitan la regeneración de plantas es importante, ya que laproducción de semillas es poco frecuente. El objetivo del siguiente trabajo fue evaluar el tiempo de exposición (15, 30, 45 días) de los explantes a diferentes concentraciones de Picloram (PIC) para la obtención in vitro de embriones somáticos, con el fin de su utilización en planes de conservación de germoplasma. Para ello se trabajó con Arachis glabrata, accesión L6, previamente establecidas invitro. El medio de cultivo empleado estuvo constituido por las sales minerales, vitaminas y sacarosa de acuerdo con Murashige y Skoog (1962) -MS- suplementado con Picloram 1, 5, 10, 20, 30 mg/L. El pH de los medios fue ajustado a 5,8 antes del agregado del gelificante (Agar al 0,7%). Los tubos fueron obturados con papel de aluminio y esterilizados en autoclave (0,101 Mpa durante 20 min). La incubación se realizó en un cuarto climatizado (27 ± 2 oC), con un fotoperíodo de 14 horas y una intensidad de 116 μm.m-2s-1. Se tomaron como fuentes de explantes las primeras hojas inmaduras de 2-4 mm y fueron colocados sobre 3 cm3 de medio de cultivo en tubos de vidrio de 11 cm3 de capacidad, los cuales fueron obturaros con Resinite AF 50. Al cabo de los días de inducción, se realizó la transferencia de los explantes a un medio basal sin reguladores y un medio basal con carbón activado (0,2 g/L). A los 30 días de cultivo se analizó el porcentaje de explantes quepresentaban embriones y el número promedio de embriones por explante. Si bien fue posible obtener embriones en medios con solo 15 días de exposición, la eficiencia en la regeneración de embriones somáticos depende tanto del medio de cultivo empleado como del tiempo de inducción. Los máximos valores de porcentaje de explantes que regeneran embriones y el número de embriones por explante, se consiguieron con PIC 10 mg/L con un tiempo de inducción de 45 días,brindando 40% de explantes con embriones para los subcultivados en MS + CA 0,2 g/L y casi 35% de explantes con embriones para los subcultivados en MS sin reguladores, con 23 y 16 embriones por explante respectivamente.