Propiedades cinéticas y estructurales de la enzima málica dependiente de NADP de trigo

PAULA CASATI; CLAUDIA P. SPAMPINATO; MARÍA L. FALCONE FERREYRA; CARLOS S. ANDREO

Mendoza

Congreso; XXI Reunión de la Sociedad Argentina de Fisiología Vegetal; 1996

Sociedad Argentina de Fisiología Vegetal

La enzima málica dependiente de NADP cataliza la decarboxilación oxidativa del L-malato en presencia de un metal divalente para producir piruvato, CO2 y NADPH. La mayor información acerca de las propiedades cinéticas y estructurales de la EM-NADP se han obtenido con la enzima proveniente de plantas C4. En maíz, se han descripto dos isoenzimas con características diferenciales, una mayoritaria que se induce por luz con función fotosintética, mientras que la otra cumpliría funciones no autotróficas. El objetivo del presente trabajo fue analizar las propiedades cinéticas y estructurales de la enzima presente en una planta C3 como trigo. Electroforesis en geles de poliacrilamida en condiciones desnaturalizantes de la enzima purificada de tallos de trigo mostró una única banda proteica con masa molecular de 72 kDa, mientras que el pI nativo de la enzima fue 5,7; diferente al de la enzima fotosintética de maíz siendo de 6,6. Respecto a sus propiedades cinéticas, la enzima presentó un pH óptimo cercano a la neutralidad (7,15) y su actividad fue dependiente de la presencia de un catión divalente. Cuando las velocidades iniciales de la reacción se estudiaron en función de las concentraciones libres de NADP o malato se obtuvieron gráficas típicamente hiperbólicas , con valores de Km de 38 y 970 mM, respectivamente. Los resultado descriptos indican la existencia en plantas C3 de una isoenzima con características cinéticas, estructurales y funcionales diferentes a la implicada en el metabolismo C4.