Identificación de receptores y de señales intracelulares activadas por el factor estimulante de colonias de granulocitos en células trofoblásticas

V. J. MARINO; A. STERIN-PRYNC; L.P. ROGUIN

Mar del Plata. Argentina

Congreso; L Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2005

SAIC

El factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) es una citoquina que,  luego de unirse a receptores de células del linaje mieloide, promueve la proliferación y diferenciación de precursores a neutrófilos y activa las funciones de los neutrófilos maduros. Aunque se ha descripto la presencia del receptor para G-CSF en células no hematopoyéticas, la activación de señales intracelulares y su respuesta biológica no han sido todavía determinadas. En un estudio previo demostramos que la misma región de la molécula de G-CSF está involucrada en la unión a receptores presentes en placenta o en   células mieloides (NFS-60). En el presente trabajo, con el fin de identificar los posibles mecanismos de transducción de señales del G-CSF en el tejido placentario, utilizamos una línea de células trofoblásticas derivadas de un coriocarcinoma humano (JEG-3). En primer lugar, detectamos receptores para G-CSF en estas células y estimamos los parámetros de la interacción, siendo la constante de afinidad y la capacidad de unión 3x109 M-1 y 1290 sitios/célula, respectivamente. Estos valores no difirieron significativamente de los obtenidos en células NFS-60. Para determinar si la unión de la citoquina en células trofoblásticas induce la activación de proteínas intracelulares, realizamos ensayos de estimulación con G-CSF y posterior inmunoprecipitación. Los resultados obtenidos demostraron que el G-CSF indujo la fosforilación de las quinasas Jak1, Jak2 y del factor de transcripción STAT3, pero no de las proteínas STAT1 y STAT5, tanto en células NFS-60 como JEG-3. Cuando se estudió la participación de la vía de las protein-quinasas activadas por mitógenos (MAPK) se observó la fosforilación de la MAPK p38 sólo en las células mieloides. En resumen, este trabajo permitió identificar receptores para G-CSF en células trofoblásticas y constituye la primera evidencia de activación de mecanismos de transducción en respuesta a la citoquina en estas células.