Método de Dilución para Determinar la Concentración Inhibitoria Mínima de Extractos Vegetales y Aceites Esenciales

SANCHEZ L.A.; ROVATI J.I; VEGA DE VIE M.; CATALÁN C.A.N

San Miguel de Tucumán

Congreso; III Jornadas Científicas y Encuentro de Jóvenes Investigadores Augusto Palavecino; 2002

Facultad de Bioquímica, Quimica y Farmacia

La investigación de la actividad antimicrobiana en extractos vegetales presenta algunos inconvenientes debido a la gran variedad de criterios y técnicas empleadas y porque, frecuentemente las muestras a ensayar son de naturaleza lipofílica. La insolubilidad en el agua de los aceites esenciales y de los extractos no polares son ejemplos típicos de esta problemática. Objetivos: Desarrollar un método que permita solucionar los problemas de solubilidad de la muestra para lograr un buen contacto del microorganismo con el o los principios activos presentes; con el objeto de obtener resultados reproducibles y confiables.Materiales y métodos: Se determina la concentración inhibitoria mínima (MIC) para cuantificar la actividad antimicrobiana de extractos de plantas y aceites esenciales. Los microorganismos usados fueron: Escherichia Coli  (ATCC 252413), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 10755), Staphylococcus aureus y Klebsiella pneumoniae. Fueron replicados a partir de cultivo proveniente de agar blando, en  Tripticase soy broth e incubados a 37 °C durante 24 h. Luego cada cultivo fue nuevamente repicado en 10 ml de medio fresco e incubado 18 h. más, bajo las mismas condiciones. Los inóculos se estandarizaron midiendo la absorbancia a 550 nm para obtener para obtener una concentración celular de aproximadamente 1.106 ufc/µl. Las muestras de los extractos y de los aceites esenciales se probaron en tres concentraciones diferentes. Los extractos 1000; 500 y 100 µg/ml, con no mas de un  2% del solvente y buffer fosfato ph 7, agitando vigorosamente hasta lograr una dispersión o solución homogénea Para los aceites 5; 10 y 15 µl/ml, disueltos en agua destilada adicionada con Tween 80 ( 1%  v/v )  y agitando en las mismas condiciones anteriores. Luego se inocularon los diferentes microorganismos a ensayar. Placas de Petri conteniendo Tripticase soy agar, fueron sembradas por estrías con las diluciones que contienen el microorganismo de prueba. La siembra se incuba a 37 °C por 24 h. y se observa. Resultados y conclusión:  Los resultados fueron promisorios, ya que permiten: 1°- trabajar con cantidades pequeñas de la muestra y 2°- lograr un buen contacto entre el microorganismo y el o los principios activos presente en la misma.