Detección molecular del gen lnuB en cepas de Streptococcus agalactiae en la provincia de Misiones

SOTO PA, BOBADILLA FJ, NOVOSAK MG, FONSECA MI, PEGELS ER, OVIEDO PN, QUIROGA MI, LACZESKI ME, VERGARA MI

Santa Fe

Jornada; III Congreso Bioquímico del Litoral. XVI Jornadas Argentinas de Microbiología; 2015

Asociación Argentina de Microbiología

Detecciónmolecular del gen lnuB  en cepas de Streptococcus agalactiae en la provincia de Misiones Streptococcus agalactiae (SGB) es la principal causa deinfecciones neonatales, provocando neumonía, sepsis y meningitis. SGB colonizatracto gastrointestinal y geniturinario humano. El niño adquiere elmicroorganismo de la madre colonizada antes o durante el parto. El Centro paraControl y Prevención de Enfermedades (CDC), propone dos estrategias para prevenirla morbilidad y mortalidad infantil: identificar los factoresde riesgo (nacimiento previo con enfermedad invasiva por SGB, bacteriuria porSGB durante el embarazo, parto prematuro, temperatura intraparto igual o mayorde 38ºC, rotura prematura de membrana igual o mayor de 18 h) y detección de laportación de SGB en el tracto genito anal de la embarazada entre las 35 ? 37semanas de gestación. Detectada la colonizaciónla profilaxis intraparto (PIP) con penicilina haredundado en el descenso de la enfermedad neonatal invasiva en aquellasregiones que la han adoptado.En pacientes con alergia abeta-lactámicos el uso de macrólidos está recomendado. Debido al aumento de laresistencia a estos antimicrobianos durante la última década es necesario unmonitoreo constante de la sensibilidad de SGB.Recientementese ha descripto un nuevo gen, el lnu(B) involucradoen el desarrollo de resistencia a lincosamidas que codifica para una enzimalincosamida nucleotidiltransferasaresponsable de la inactivación de las lincosamidas por un mecanismo deadenilación. Fenotípicamente esta resistencia se evidencia por resistencia aClindamicina (CLI) y sensibilidad a Eritromicina (ERI) en las pruebas desensibilidad por difusión, identificado como fenotipo L.Elobjetivo de este trabajo fue detectar la portación del gen lnu(B) en cepas de SGB aisladas de mujeres embarazadas.Seestudiaron 150 cepas de SGB en las que previamente se  determinaron los fenotipos de resistencia a  macrólidos-lincosamidas-estreptograminas B(MLSB) con el ensayo de doble-disco (D-test) en agar Mueller-Hinton(Britania, Argentina) suplementado con sangre ovina al 5% con discos de ERI (15µg) y CLI (2 µg) (Britania, Argentina) según recomendaciones e interpretacióndel Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).Para este estudio las cepas fueron recuperadas de su conservación a -80ºC en leche descremada al20% en placas de agar sangre ovina al 5% y sometidas a pruebas deidentificación bioquímica convencional y serológicas de grupo para confirmar pureza. La portación del gen lnu(B) se investigó contécnica de PCR convencional, utilizando cebadores diseñados con el programa Primer3 versión 0.4.0 y la secuencia delgen obtenida de GenBank (N° AJ238249). La puesta a punto de la técnica se realizócon una cepa de SGB portadora del gen lnu(B)cedida por la Administración Nacional de Laboratorios eInstitutos de Salud- (ANLIS) ?Dr. Carlos Gregorio Malbrán?. Elfenotipo L y la presencia del gen lnu(B) nofueron detectados obteniéndose resultados concordantes por métodos fenotípicosy moleculares. Nuestros resultados concuerdan con otros autores que indicanasociación entre detección fenotípica y molecular de mecanismo de resistenciapor adenilación de lincosaminas.El monitoreo constante de la sensibilidad a macrólidos yla investigación de nuevos mecanismos de resistencia es necesario paracontribuir a la prevención de la severa enfermedad neonatal causada por SGB.