ANÁLISIS GENÉTICO POR TÉCNICA DE RAPD EN CEPAS INVASIVAS DE STREPTOCOCCUS AGALACTIAE

CORTESE, J.; BOBADILLA, F.; NOVOSAK, M.; LACZESKI, M.

Posadas

Jornada; XI Jornadas Internacionales de Enfermedades Transmisibles y VII Jornadas Internacionales de la Salud y la Educación; 2017

AIMET-UNAM-CEDIT

Introducción: Streptococcus agalactiae o estreptococo del grupo B (SGB), es un coco beta hemolítico que forma parte de la microbiota normal del tracto gastrointestinal y urogenital del ser humano. Además de ser la principal causa de infecciones invasivas perinatales severas, es responsable de morbilidad infecciosa materna y enfermedad invasiva en adultos inmunocomprometidos e inmonucompetentes.Durante las últimas dos décadas se han introducido técnicas moleculares en epidemiología. El análisis Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) es un método accesible y sensible basado en el uso de cebadores arbitrarios para amplificar segmentos polimórficos de ADN, siendo un método poderoso para diferenciar cepas de SGB. Basándonos en la información anterior, se plantea la siguiente hipótesis: los polimorfismos en el ADN observados por la técnica de RAPD permiten determinar la existencia de clones entre cepas invasivas de SGB.Objetivo: Determinar la relación clonal entre aislamientos de SGB recuperados de pacientes con enfermedad invasiva.Metodología: Se utilizaron 30 cepas de SGB recuperados de pacientes con enfermedad invasiva, aislados de muestras de hemocultivo, líquido cefalorraquídeo, piel y partes blandas. Las cepas fueron aisladas inicialmente en el Laboratorio de Alta Complejidad de Misiones (LACMI) y conservadas en leche descremada al 20% a -80°C en el cepario de la Cátedra de Bacteriología de la FCEQyN. Se trabajó con el cebador OPS11 5´AGTCGGGTGG y el patrón de bandas obtenido se analizó mediante UPGMA con el software estadístico para Excel, XLSTAT 2017Resultados: Se obtuvieron 16 patrones de amplificación y un total de 141 bandas. Los polimorfismos fueron más evidentes (76%) entre los 500-2000pb, las cepas presentaron un mínimo de 4 y un máximo de 13 bandas. Se definieron subgrupos clonales con bajo porcentaje de similitud (≤ 80 %) lo que señala la elevada diversidad genética. Las cepas 06270 /06272 y 06151/E6149 fueron agrupadas en el mismo cluster al tratarse de muestras de un mismo paciente infectado.Conclusiones: La técnica de RAPD permitió confirmar la existencia de clones entre cepas invasivas de SGB. Se observó una diseminación multiclonal de las cepas circulantes en la región. Resulta de suma importancia el análisis epidemiológico de cepas invasivas de S. agalactiae, para sumar las herramientas necesarias a la hora de proponer estrategias de prevención así como para el tratamiento de personas afectadas.