"FIBROBLASTOS SINOVIALES EN EL MICROAMBIENTE SINOVIAL DE ESPONDILOARTRITIS: INDUCCIÓN DE INTERLEUQUINA-6 POR LA PROTEÍNA S100A8 "

BLAS RODRIGO; ELICABE JAVIER; ALICIA MUNARRIZ; PARDO HIDALGO R; , DI GENARO MS

Salta

Congreso; 52 CONGRESO ARGENTINO DE REUMATOLOGÍA; 2019

Sociedad Argentina de Reumatología

INTRODUCCION: Los fibroblastos sinoviales (FS) contribuyen a la inflamación y daño tisular en artropatías inflamatorias crónicas. El líquido sinovial (LS) constituye el microambiente en el que los FS experimentan los cambios fenotípicos propios de cada artropatía. Los efectos sobre FS de este microambiente sinovial no han sido profundamente estudiados en espondiloartritis (EspA). En trabajos previos hemos reportado la inducción de la secreción de IL-6 por FS estimulados con un pool de LS de pacientes con EspA. Además, un estudio proteómico del LS demostró la presencia de la alarmina S100A8, una proteína recientemente sugerida como blanco en el diagnóstico y tratamiento de enfermedades reumáticas. Sin embargo, la participación de S100A8 del microambiente sinovial en la inducción de la secreción de IL-6 por FS no ha sido previamente explorada.OBJETIVOS: El propósito del presente trabajo fue confirmar la presencia de S100A8 en LS de pacientes con EspA e investigar la participación de S100A8 en la inducción de la producción de IL-6 por FS estimulados en el microambiente sinovial de EspA. MATERIALES Y METODOS: Se analizó por western-blot (WB) la presencia de S100A8 en un pool de 9-10 LS de pacientes con EspA empleando un anticuerpo anti-S100A8/A9. La proteína S100A8 recombinante fue empleada como control positivo. Por otra parte, FS de la línea SW982 fueron estimulados con el pool de LS de EspA tratado con hialuronidasa en presencia o ausencia del anticuerpo neutralizante anti-S100A8/A9. Células no estimuladas fueron empleadas como controles negativos. Además, los FS fueron estimulados con diferentes concentraciones de S100A8 (1-10 ug/ml). Luego de 24, 48, 72 o 96 hs del estímulo, los niveles de IL-6 fueron cuantificados en los sobrenadantes de cultivo empleando un kit comercial de ELISA. Inhibidores de las proteína-quinasas activadas por mitógenos (MAPKs) ERK, JNK o p38, y tofacitinib fueron empleados para analizar cascadas de señalización involucradas en la secreción de IL-6 por FS.RESULTADOS: Una banda de 10 kDa correspondiente al peso molecular de S100A8 fue detectada por WB en el pool de LS de EspA. A las 72 hs luego del estímulo con 10 ug/ml de S100A8 se indujo la secreción de niveles significativos de IL-6 por FS (p