Expresión diferencial de IL-6 y metaloproteinasa 9 por fibroblastos sinoviales estimulados con líquidos sinoviales de pacientes con osteoartritis, espondiloartropatías o artritis reumatoidea

DI GENARO MS; BLAS R; MUNARRIZ ALICIA; PARDO-HIDALGO R; TAMASHIRO H,

Mendoza

Congreso; 46º Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Reumatología (SAR); 2016

Sociedad Argentina de Reumatología

INTRODUCCION: Los fibroblastos sinoviales (FS) sufren cambios fenotípicos patogénicos en artrotopatías crónica. Así, en estas enfermedades, los FS incrementan su capacidad proliferativa, contribuyen a perpetuar la inflamación a través de la secreción de citoquinas e inducen la destrucción de cartílago y hueso por medio de la producción de metaloproteinasas (MMP) que degradan la matriz extracelular. La MMP9 es una gelatinasa, miembro de la familia de endopeptidasas dependientes de Zn, que degrada colágeno I y II, y participa en la patogénesis de las artritis correlacionando positivamente con la progresión y severidad de la enfermedad. Los líquidos sinoviales (LS) poseen una composición compleja que determina el microambiente en el que se encuentran los FS. Los mecanismos que participan en los cambios de FS a un perfil patogénico no han sido completamente dilucidados.OBJETIVO: Con el propósito de investigar los mecanismos que influyen en el fenotipo patogénico de FS, en el presente trabajo comparamos los efectos de LS provenientes de pacientes con osteoartritis (OA), artritis reumatoidea (AR) o espondiloartritis (SpA) sobre la producción de citoquinas y MMP9 por FS.MATERIAL Y METODO: FS fueron aislados desde LS de pacientes con AR por cultivo en medio DMEM completo con 10% de suero fetal bovino (SFB) y sucesivos pasajes. Luego del tercer pasaje, las células mostraron morfología homogénea bipolar típica y expresaron prolil 4-hidroxilasa. Los FS de pasajes 4-6 fueron estimulados con un pool de 10 LS de pacientes con OA, AR o SpA en medio DMEM sin SFB. Las células no estimuladas fueron empleadas como controles. Los sobrenadantes (SN) de cultivo fueron obtenidos a las 24, 48 y 72 hs de estimulación. Los niveles de las citoquinas factor de necrosis tumoral (TNF), Interleuquina (IL)-6, IL-23 y factor de crecimiento transformante (TGF)-b fueron cuantificados en los SN empleando kits comerciales de ELISA. La actividad de MMP9 fue estudiada por zimografía y se midió la intensidad de las bandas observadas empleando el programa Image J.RESULTADOS: se observó que TGF-b fue producido basalmente por los FS y la estimulación con los LS no incrementó significativamente su secreción. Si bien TNF e IL-23 fueron inducidos en forma progresiva por los LS de todas las artropatías ensayadas, IL-6 fue secretada solo frente al estímulo con LS de pacientes con AR o SpA. Cuando se analizó la actividad de MMP9 se observó que en contraste a LS de pacientes con OA, los LS de pacientes con AR o SpA estimularon en FS la secreción creciente de MMP9 activa. CONCLUSIONES: Concluimos que los LS de pacientes con AR o SpA promueven en FS tanto la secreción de IL-6 como la producción sostenida de MMP9 activa. Estos resultados sugieren que los LS de pacientes con AR o SpA recrean para FS un microambiente diferencial y más patogénico que el mostrado por LS de pacientes con OA.