INVESTIGADORES
DI GENARO Maria Silvia
congresos y reuniones científicas
Título:
ESTUDIO DEL GRADO DE ATENUACIÓN DE UNA CEPA MUTANTE DE Yersinia enterocolitica DEFICIENTE EN YOPH.
Autor/es:
DAVE MN; DI GENARO MS.
Lugar:
San Juan
Reunión:
Congreso; 2da Reunion Conjunta de Sociedades de Biologia de la Republica Argentina; 2011
Institución organizadora:
Sociedades Argentina de Biologia
Resumen:
Yersinia enterocolitica (Ye) es una bacteria que causa enfermedades gastrointestinales. Proteínas externas de Yersinia (Yops), codificadas en el plásmido de virulencia pYV, le permiten evadir mecanismos inmunes y sobrevivir en los tejidos linfoides del hospedador. Yop H evita la fagocitosis de Ye por macrófagos y bloquea la activación linfocitaria. El objetivo fue investigar el grado de atenuación de una cepa de Ye deficiente en YopH (Ye ΔyopH) luego de la infección oral en ratones C57BL/6. Para demostrar la ausencia de Yop H en la cepa mutante, se analizó por SDS-PAGE el perfil de Yops secretadas al medio de cultivo. Para este análisis, Ye O:8 wild-type. (cepa WA-314) y Ye ΔyopH fueron cultivadas a 25 ºC y luego a 37 ºC. Se indujo la expresión y secreción de Yops, las que fueron precipitadas con ácido tricloroacético (TCA) y analizadas por SDS-PAGE al 12 %. Ratones C57BL/6 hembras de 6-8 semanas fueron infectados por vìa oral con Ye WA-314 o ΔyopH (1-5 x 108 ufc). Se registró el porcentaje de supervicencia durante 21 días, y realizaron recuentos bacterianos los días 7 y 21 desde materia fecal y homogenatos de bazo (B), ganglio linfático mesentérico (GLM) y placas de Peyer (PP). El perfil de Yops demostró la ausencia de YopH en la cepa mutante. La supervivencia de los ratones fue mayor al 80% en ratones infectados con Ye ΔyopH vs 50% en aquellos infectados con WA-314. Recuentos en materia fecal fueron marcadamente menores en ratones infectados con Ye ΔyopH (p<0,001). El día 7, ratones infectados con Ye ΔyopH mostraron recuentos bacterianos significativamente menores en B, GLM y PP (p<0,0001), comparados con los infectados con Ye WA-314. El día 21, la cepa mutante fue totalmente clarificada en todos los órganos ensayados. De los resultados se concluye que Ye ΔyopH resultó marcadamente atenuada luego de la infección oral en ratones, sugiriendo el potencial de esta cepa como vacuna vector para inmunizaciones orales