Artritis Reactriva inducida por Yersinia enterocolitica: Uso de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y enzimoinmunoensayo (ELISA) para el estudio de líquidos sinoviales

LACOSTE G; DI GENARO M; TAMASHIRO H; STEFANINI A.

Buenos Aires

Congreso; XVII Congreso Latinoamericano de Microbiología, X Congreso Argentino de Microbiología; 2004

Asociacion Argentina de Microbiologia

Yersinia enterocolitica es una bacteria Gram-negativa que causa un amplio rango de manifestaciones clínicas. Una de las secuelas potenciales de la infección intestinal por Y. enterocolitica incluye la artritis reactiva (ARe). La ARe es una sinovitis aséptica, que desarrolla después de una infección primaria distante a la articulación. Antígenos bacterianos, principalmente lipopolisacárido (LPS), han sido hallados en las articulaciones inflamadas. Usando reacción en cadena de la polimerasa (PCR) algunos estudios han detectado DNA de Yersinia en articulaciones de pacientes. Sin embargo un estudio de la sensibilidad de la PCR en líquidos sinoviales (LS) no ha sido previamente realizado. Los objetivos del presente trabajo fueron: a) Investigar anticuerpos específicos para antígenos de Yersinia y DNA bacteriano en LS de pacientes con artropatías del Complejo Sanitario San Luis. b) Estudiar la sensibilidad de una reacción de PCR para Yersinia en un LS inflamatorio. Se investigaron por ELISA la presencia de anticuerpos específicos para LPS, sonicado y proteínas de sobrenadante (SN) de cultivo de Yersinia. Se analizaron 5 LS de pacientes con espondiloartroptías (SpA) y en 20 con artritis reumatoidea (AR). Veinte LS de pacientes con artrosis (enfermedad no relacionada a procesos infecciosos) fueron empleados como controles y para calcular el punto de corte. Los LS con absorbancias superiores al punto de corte fueron considerados positivos. Se realizó PCR específica para el gen LcrE en los LS de pacientes con AR que mostraron respuesta de anticuerpos positiva y en los 5 LS de pacientes con SpA.  Para determinar la mínima concentración detectable de DNA de Yersinia y el mínimo número detectable de la bacteria, se realizaron diluciones seriadas de orden 10 del DNA bacteriano purificado y de una suspensión bacteriana de recuento conocido. La PCR fue realizada empleando como templado el DNA extraído de un LS inflamatorio que fue contaminado con las diferentes diluciones de la bacteria o del DNA bacteriano. Se observó respuesta de anticuerpos específicos para LPS en 6 LS de pacientes con AR, dos de los cuales también mostraron respuesta de anticuerpos para el sonicado y para proteínas de SN de Yersinia. Un LS de un paciente con SpA mostró respuesta positiva de anticuerpos para LPS. Reacción de PCR positiva fue observada en 6 LS de pacientes con AR y en 4 de pacientes con SpA. En el estudio de sensibilidad de la PCR, se detectó reacción positiva en el LS contaminados con hasta 1  unidad formadora de colonia (UFC) o 60 fg de DNA de Yersinia. De los resultados se concluye que respuesta de anticuerpos específicos para antígenos de Yersinia y DNA de la bacteria pueden ser detectados en LS sinoviales de pacientes con artropatías de nuestra región, siendo la reacción de PCR ensayada más sensible que la detección de anticuerpos.