EFECTOS PRO-INFLAMATORIOS DE MEMBRANA EXTERNA DE YERSINIA ENTEROCOLITICA O:3 EN MACROFAGOS PERITONEALES DEFICIENTES EN EL RECEPTOR P55 DE TNF ALFA

RJ ELIÇABE; C GARCÍA SAMARTINO; GH GIAMBARTOLOMEI; MS DI GENARO.

Mar del Plata

Congreso; LII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica. LV Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología. Sociedad Argentina de Fisiología.; 2007

Sociedad Argentina de Inmunología (SAI), Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas (SAIC)

Los macrófagos son células que infiltran en forma predominante las sinovias de pacientes con artritis reactiva (ARe), una sinovitis aséptica que desarrolla luego de infecciones en el tracto gastrointestinal o genitourinario. Uno de los agentes infecciosos frecuentemente asociados a esta patología es Yersinia enterocolitica, una bacteria Gram negativa que causa enteritis y linfadenitis mesentérica. En estudios previos demostramos que la membrana externa  (ME) de Yersinia contiene los principales componentes artritogéncios en ratones deficientes en TNFRp55. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la respuesta inflamatoria de macrófagos TNFRp55-/- estimulados con ME de Y. enterocolitica O:3. Purificaciones de ME fueron realizadas y su perfil proteico analizado por SDS-PAGE. Macrófagos peritoneales provenientes de ratones C57BL/6 normales y TNFRp55-/- fueron estimulados con ME y LPS de Yersinia. Oxido nítrico (NO) y citoquinas pro-inflamatorias (TNF-a e IL-6) fueron determinadas en sobrenadantes de cultivo después de 72 hs de estimulación. Se analizaron cambios morfológicos y expresión de RNAm de TLR2, TLR4 y TNF-a. Macrófagos TNFRp55-/- produjeron mayores niveles de NO luego de ser estimulados con LPS (p<0,001) o ME (p<0,003), y de TNF-a (p<0,05) e IL-6 (p<0,05) con ambas estimulaciones. Además, macrófagos TNFRp55-/- mostraron mayor expresión de RNAm de TLR2, TLR4 y TNF-a luego de 4 hs de estimulación con ME. Interesantemente, macrófagos provenientes de ratones C57BL/6 normales mostraron cambios que sugirieron apoptosis a las 72 hs de estimulación, y que correlacionaron con su menor grado de activación. En base a estos resultados concluimos que la deficiencia de TNFRp55 conduciría a una hiperestimulación de los macrófagos con una mayor capacidad de respuesta a componentes bacterianos involucrados en el desarrollo de ARe.