DETECCIÓN MOLECULAR DE HLA-B27 EN PACIENTES CON ESPONDILOARTROPATÍAS.

SALVARREDI L.A; LACOSTE M.G; GUZMÁN A.M.S; DI GENARO, M.S.

Huerta Grande, Córdoba, Argentina.

Congreso; I Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina.; 2007

Sociedades de Biología de la República Argentina

Los antígenos leucocitarios humano (HLA) están asociadas en muchos casos a patologías autoinmunitarias. HLA-B27 presenta una fuerte asociación con las espondiloartropatias (SpA) constituyendo un marcador diagnóstico y  pronóstico. De esta manera la determinación de HLA-B27 es de interés clínico en pacientes reumatológicos. El objetivo fue  optimizar un ensayo para la detección de HLA-B27 por métodos moleculares (PCR y PCR a tiempo real) para ser aplicado en muestras de sangre y líquidos sinoviales de pacientes con SpA. Se compararon dos métodos de extracción de DNA por salting out a partir de muestras de sangre y líquido sinovial.  Un método convencional y uno con adición de NaClO4  fueron aplicados sobre 40 y 80 muestras de sangre, respectivamente. Se evaluó el grado de pureza (DO 260/280)  y la preservación de la integridad. La determinación genotípica de HLA-B27 se realizó por PCR-SSP en las muestras de interés clínico y en 100 muestras de sangre aleatoriamente seleccionadas provenientes del Hospital de San Luis. Se co-amplificó HLA-B27 con el gen de b-globina como control interno de amplificación.  El grado de pureza e integridad del DNA fue mayor en las muestras extraídas por el método con NaClO4.  De las 100 muestras de sangre, 1 (1%) resultó positiva. Una muestra de líquido sinovial de un paciente resultó positiva para HLA-B27. El trabajo permitió optimizar la determinación molecular de HLA-B27 que podrá ser aplicada en pacientes con artropatías.