Detección de apoptosis en ratones inmunodeficientes infectados con Yersinia enterocolitica O:3.

GUTIÉREZ J, D. CATRO, J. ELICABE, S DI GENARO

San Luis

Jornada; 2as Jornadas de Bioquímica y Biología Molecular; 2006

Universidad Nacional de San Luis

Yersinia enterocolitica es una bacteria Gram negativa que causa enteritis y enterocolitis en humanos y roedores. Infecciones sistémicas en tejidos profundos con abscesos en bazo e hígado pueden ocurrir en condiciones de inmunodeficiencia. Se ha demostrado que durante los primeros 3 días después de la infección con Y. enterocolitica, los mecanismos de defensa innata controlan la infección por este patógeno. Interleuquina (IL)-12, por inducción de interferón (IFN)-g y factor de necrosis tumoral (TNF)-a participan en la protección frente a infecciones por Yersinia. En contraste, IL-4 antagoniza la respuesta protectora frente a esta bacteria. La apoptosis es un mecanismo de suicido celular innata que participa en la homeostasis de organismos multicelulares y puede jugar un rol en algunas infecciones. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la apoptosis inducida en ratones inmunodeficintes infectados con Y. enterocoltica O:3. Ratones control C57BL/6 y ratones knockout en TNFRp55 (receptor p55 de TNF-a), IL-12 o IL-4, fueron infectados por vía intragástrica con 2 x 107 -2 x 108 ufc de Y. enterocolitica O:3. Al tercer día post-infección los ratones fueron sacrificados. Se analizó la inducción de apoptosis en bazo, ganglios linfáticos mesetérico (GLM) y placas de Peyer (PP). La apoptosis fue evaluada empleando los siguientes métodos: tinción con bromuro de etidio-naranja de acridina (apoptosis temprana y tardía), fragmentación de DNA (apoptosis tardía), y estudio por RT-PCR de la expresión de genes pro- y anti-apoptóticos (Bax y Bcl-2, respectivamente). Se observaron diferencias en la inducción de apoptosis en bazo de ratones deficientes en IL-4 (p<0,05 comparado con el grupo control). Mayor fragmentación de DNA y expresión de Bax fue detectada en PP y GLM respectivamente, de ratones knockout en IL-12. Se concluye que la deficiencia de citoquinas influencia la apoptosis desencadenada frente a la infección oral con Yersinia. La inducción de apoptosis in vivo estaría relacionada con el estado funcional  del sistema inmune.