INVESTIGADORES
LACCONI Gabriela Ines
congresos y reuniones científicas
Título:
Empleo de la espectroscopía Raman para la investigación de monocapas de lípidos y proteínas soportadas sobre silicio
Autor/es:
J. KLUG; F. LURGO; G. BORIOLI; G. I. LACCONI*
Lugar:
Córdoba
Reunión:
Congreso; Nanocórdoba 2014; 2014
Resumen:
Empleo de la espectroscopia Raman para la investigacion de
monocapas de lipidos y proteınas soportadas sobre silicio
Klug J, Lurgo F, Borioli G, LACCONI G
La implementacion de la espectroscopıa Raman en la investigacion de monocapas y bicapas de lipidos soportadas
sobre plataformas solidas es actualmente un tema de gran interes a nivel de la nanoescala, en la ciencia basica
y aplicada. Estos sistemas de interes biofisico, son utilizados como modelos de las membranas celulares y consisten
en estructuras auto-organizadas de lipidos que pueden presentar microdominios de distintas fases. Este aspecto
juega un papel muy importante en procesos biologicos, tales como la estabilizacion de moleculas de proteinas
o peptidos en el ambiente organizado de la membrana. La espectroscopia Raman ofrece un medio no invasivo
para el analisis quimico y estructural de las monocapas lipidicas y sus microdominios conteniendo proteinas. Por
otra parte, el empleo de plataformas activas para la intensificacion de la senal espectroscopica (Surface-Enhanced
Raman Spectroscopy, SERS), permite la deteccion molecular con alta sensibilidad (1, 2).
El estudio realizado comprende dos etapas: I) Obtencion de plataformas activas SERS; II) Caracterizacion
espectroscopica de monocapas de Langmuir con proteinas en las plataformas SERS. En la primer etapa se utilizaron
obleas hidrogenadas de n-Si(111) sobre las cuales se electrodepositaron nanoparticulas de plata (Ag). La
distribucion del tamano y forma de las particulas fue modificada al variar el programa potencial-tiempo aplicado
y en todos los casos, la actividad SERS, fue establecida con las se?nales de la molecula de prueba Rodamina 6G
adsorbida sobre la plataforma. La mayor sensibilidad para la detecci´on Raman se obtuvo con cristalitas de Ag
(radio promedio 23 nm) depositadas por un doble pulso de potencial (nucleacion y crecimiento) sobre el silicio en
soluciones de KClO4 0,1 M + AgClO4 1,0 mM.
En la segunda etapa se estudiaron las caracteristicas estructurales y moleculares de monocapas de Langmuir-
Blodgett, formadas con moleculas de lipidos PIP2 (Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate) y con moleculas de
proteinas MARCKS (Myristoylated alanine-rich C-kinase substrate) a presiones de 15 y 30 mN m-1, respectivamente,
como asi tambien de la mezcla 1:1 PIP2-MARCKS. El analisis espectroscopico, empleando radiacion
laser 632,8 nm se realizo mediante la transferencia de las monocapas sobre plataformas de silicio monocristalino
activadas para SERS.
En la presente comunicacion se muestra como mediante los espectros SERS se obtiene informacion molecular
y estructural sobre las monocapas de Langmuir de moleculas PIP2 y de la proteina MARCKS, soportadas sobre
plataformas de silicio conteniendo particulas electrodepositadas de Ag. Ademas, se han establecido las condiciones
experimentales para la construccion de plataformas activas optimizadas para la intensificacion Raman.
Agradecimientos: CONICET, SECyT-UNC, FONCyT, CEMETRO-UTN (Dres. D. Brussa y C. Schurrer),
LAMARX-IFEG (SNM) y LANN-INFIQC (SNM).
Referencias: (1) C. S. Sweetenham, M. Larraona-Puy, I. Notingher, Appl. Spectr. 65 (2011) 1387-1392.
(2) S. Abalde-Cela, P. Aldeanueva-Potel, C. Mateo-Mateo, L. Rodr´ıguez-Lorenzo, R. A. Alvarez-Puebla, L.
M. Liz-Marz´an, J. R. Soc. Interface 7 (2010), S435-S450.