Detección de Neospora caninum en fetos bubalinos (Bubalus bubalis) obtenidos de madres inoculadas experimentalmente

KONRAD, J.L.; CRUDELI, G.A.; MOORE, P.; CASPE, G.; LEUNDA, M.; ODEÓN, A.; CAMPERO, C.M.

Córdoba

Simposio; 9° Simposio Internacional de Reproducción Animal; 2011

Instituto de Reproducción Animal Córdoba

El objetivo del presente estudio fue utilizar la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) como herramienta de diagnóstico para determinar la presencia de ADN de Neospora caninum, enfermedad que afecta la reproducción en bovinos, en fetos bubalinos obtenidos de hembras inoculadas experimentalmente. Se utilizaron 12 búfalas preñadas de la raza Mediterránea, de entre 3 y 14 años de edad, diez se inocularon con 10 8 taquizoitos de la cepa Nc1 de Neospora caninum y dos permanecieron como controles; se enviaron a faena a los 28 y 42 días post inoculación con 98, 118 y 132 días de gestación. Se realizó necropsia de los fetos y las muestras obtenidas fueron conservados a -20º C hasta su procesado para obtención de ADN por medio del kit Qiagen conforme a las recomendaciones del proveedor. Para la amplificación del ADN se realizó reacción en cadena de la polimerasa anidado (Nested PCR); ITS 1 fue la región de ADN ribosomal de Neospora caninum que se amplificó. Los productos de amplificación se incluyeron en un gel de agarosa al 2% con bromuro de etidio y se observaron bajo luz ultravioleta. Se amplificó el ADN de un total de 83 tejidos; las 14 muestras de los animales controles resultaron negativas; de las 69 muestras de los fetos inoculados 43 resultaron positivas. Los resultados obtenidos indican que los fetos inoculados tuvieron tejidos positivos a Neospora caninum y que la técnica de PCR resultó positiva en el 62,3% de las muestras de fetos obtenidos a partir de búfalas infectadas en forma experimental. En conclusión, esta técnica permite definir la presencia del parásito y representa una herramienta de diagnóstico para Neospora caninum en fetos bubalinos.