Evaluación de la tolerancia a glifosato de bacterias aisladas de suelos contaminados y de rizósfera

SALINAS, BÁRBARA; GIACCIO, GUSTAVO; ALVAREZ, ANALÍA; SÁEZ, JULIANA M.

Jornada; XIV Jornadas Internas de Investigación, Docencia y Extensión. III JIDE "Luis Medardo Monti y Analía G. Autino". Facultad de Ciencias Naturales e Instituto Miguel Lillo; 2021

Facultad de Ciencias Naturales e Instituto Miguel Lillo. UNT

El glifosato [N-(fosfonometil)glicina] es el plaguicida más utilizado en la actualidad en todo el planeta para el control de malezas. Es un herbicida no selectivo, de post-emergencia y de amplio espectro. En el año 2015, la OMS declaró al glifosato como probable cancerígeno; además se acumula en el suelo y/o se transfiere a los sistemas acuáticos. Tales hallazgos han llevado a la necesidad de desarrollar e implementar técnicas para restaurar los suelos contaminados con glifosato.El objetivo de este trabajo fue evaluar cualitativamente la tolerancia de cepas bacterianas aisladas de matrices contaminadas con glifosato y AMPA, su principal metabolito, a concentraciones elevadas de glifosato con el fin de emplearlas en estudios posteriores de biorremediación y fitorremediación.Para ello, se emplearon 20 cepas de bacterias previamente aisladas de suelo contaminado con glifosato y AMPA, y de rizósfera de especies vegetales ribereñas desarrolladas espontáneamente en suelos contaminados con ambos compuestos. Se prepararon placas de Petri con medio Caseína Almidón Agar, cuya composición es (g L-1): almidón, 10; caseína hidrolizada, 1; K2HPO4, 0,5; agar, 15; pH 7. Se retiró asépticamente una porción de medio de cultivo formando un canal central (1 cm x 7 cm). La base de dicho canal se selló con medio agar agua (15 g L-1) fundido. Posteriormente, se sembraron las bacterias en estudio en forma transversal al canal, a ambos lados del mismo. Finalmente, se dispuso en el canal una solución de glifosato en dos concentraciones (1 g L-1 y 10 g L-1). Asimismo, se llevó a cabo un control de crecimiento de las bacterias con agua. Las placas de Petri se incubaron a 30 °C durante 7 días y al final del ensayo se estimó cualitativamente la tolerancia de las mismas frente al plaguicida. Para ello, se diferenció entre crecimiento abundante (+++): altamente tolerante, moderado (++): moderadamente tolerante, escaso (+): poco tolerante y nulo (-): no tolerante.Todas las bacterias estudiadas mostraron un crecimiento abundante (+++) tanto en presencia de 1 g L-1 de glifosato, como a una concentración de 10 g L-1 del plaguicida, y, por lo tanto, se clasificaron cualitativamente como altamente tolerantes a las concentraciones evaluadas. Estos resultados no resultan sorprendentes, teniendo en cuenta que las bacterias utilizadas en el presente estudio fueron aisladas a partir de suelos y rizósfera contaminados con glifosato y AMPA (5,51 ± 1,37 mg kg-1 y 2,35 ± 1,81 mg kg-1, respectivamente). Se sabe que las comunidades microbianas que viven en ecosistemas contaminados tienden a estar dominadas por organismos capaces de tolerar y/o utilizar dichos compuestos tóxicos. En este sentido, es posible que las mismas hayan desarrollado mecanismos adaptativos para crecer en condiciones adversas. Las cepas bacterianas evaluadas en el presente trabajo podrían emplearse en estudios de biorremediación en sitios contaminados con glifosato. Actualmente se encuentran en curso ensayos cuantitativos tendientes a evaluar esta premisa.