INVESTIGADORES
ROSSI juan pablo Francisco
congresos y reuniones científicas
Título:
Fotomarcación hidrofóbica de la Na+,K+-ATPasa: Interacción con la membrana plasmática
Autor/es:
IRENE MANGIALAVORI,MÓNICA MONTES Y JUAN PABLO ROSSI.
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; 153º Jornada científica de la Academia de Farmacia y Bioquímica.; 2009
Institución organizadora:
Academia Nacional de Farmacia y Bioquímica
Resumen:
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La bomba Na+, K+
ATPasa genera gradientes electroquímicos de Na+ y K+ a
través de la membrana plasmática. Es un hétero-dímero, cuya subunidad α, está
formada por 10 segmentos transmembrana y dos grandes loops citoplasmáticos y
que constituyen el motivo característico de las P-ATPasas. La subunidad β
presenta una hélice transmembrana y un gran dominio extracelular altamente
glicosilado.
Con el objetivo de obtener
información estructural sobre el dominio hidrofóbico de la proteína, utilizamos
una técnica de fotomarcación hidrofóbica con un análogo de fosfatidilcolina ([125I] TID-PC/16). Esta estrategia nos
permite evaluar la exposición de la región transmembrana a lípidos
circundantes.
La incorporación específica
de [125I]
TID-PC/16, en membranas enriquecidas y
en la proteína extraída en micelas de C12E10, fue un 60%
mayor en presencia de K+ que en presencia de Na+. Además,
esta relación fue similar en la subunidad β. Nuestros resultados sugieren que
en presencia de Na+ la disposición de los segmentos transmembrana es
más compacta, mostrando una menor exposición a los lípidos de membrana.
Mientras que en presencia de K+, se obtiene una conformación más
abierta. Por otra parte, la menor incorporación específica en presencia de Na+
en la subunidad β, podría sugerir una mayor interacción con la subunidad α, que provoque una
menor exposición a la membrana plasmática.
Con subsidios de CONICET, ANPCYT
y UBACYT