INVESTIGADORES
ROSSI juan pablo Francisco
congresos y reuniones científicas
Título:
Cambios conformacionales en la región transmembrana de la PMCA permiten calcular una KD para Ca2+
Autor/es:
IRENE MANGIALAVORI1, MARIELA FERREIRA GOMES 1 ANA VILLAMIL GIRALDO1 Y JP ROSSI
Lugar:
Facultad de Farmacia y Bioquímica UBA
Reunión:
Congreso; 153 Reunión de la Academia Nacional de Farmacia y Bioquímica; 2009
Institución organizadora:
Academia Nacional de Farmacia y Bioquímica
Resumen:
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El propósito de este trabajo
fue obtener información estructural sobre los cambios conformacionales en la
región transmembrana de la bomba de Calcio de Membrana Plasmática (PMCA) producidos
por la unión Ca2+, calmodulina y fosfolípidos ácidos. Para ello,
cuantificamos la incorporación específica de [125I]TID-PC/16,
un análogo fotoactivable de fosfatidilcolina, titulando el cambio conformacional producido
por la unión de Ca2+ y/o los distintos activadores, que previamente
demostramos que llevan a las conformaciones E1I y E1A,
respectivamente. Los resultados indican que la modulación de la enzima es
ejercida a través del dominio C-terminal, que induce una conformación
autoinhibida aparente para el transporte de Ca2+ pero no modifica la
afinidad del dominio transmembrana por este cation. El dominio C-terminal es
afectado por calmodulina, llevando a la enzima de una conformación autoinhibida
E1I a una conformación activada, E1A, modulando de esta manera el transporte de Ca2+.
Estos datos sugieren que no sólo el dominio citoplasmático sufre un gran cambio
conformacional en presencia de activadores, sino que el dominio transmembrana
también es muy afectado, pero esto no involucra la afinidad del sitio de unión
de la proteína por el Ca2+, como indicaría el estudio de su constante de
afinidad aparente en condiciones de estado estacionario.
