AISLAMIENTO Y CARACTERIZACIÓN DE CEPAS DEL GENERO RHIZOBIUM RESISTENTES A METALES PESADOS

J. S. DÁVILA COSTA, M. J. AMOROSO, C. M. ABATE

Tafí del Valle - Tucumán

Jornada; "XXII JORNADAS CIENTIFICAS" de la Asociación de Biología de Tucumán; 2005

Los metales pesados son una de las clases más importantes de contaminantes de la naturaleza. Estos se encuentran entre los materiales más útiles que se conocen, donde el hombre, luego de extraerlos de los depósitos subterráneos, los ha fundido, refinado y convertido en bienes de consumo, donde después que los usa, los desecha. Durante cada una de estas operaciones se liberan metales al ambiente. La minería expone las rocas ricas en metales a una meteorización acelerada. Por otro lado actividades humanas como la quema de combustible fósiles también liberan metales al ambiente. Un estudio reciente estima que solo en la provincia de Buenos Aires se producen alrededor de 47.000 toneladas de residuos peligrosos al año, la mayoría proveniente de las industrias electrónica y metalúrgicas (47 %) y de la de productos químicos y petroquímicos (44 %) Una solución a estos problemas puede encontrarse en la biorremediación de los suelos contaminados utilizando plantas y microorganismos. Las bacterias del género Rhizobium son habitantes de los suelos y son bacilos aerobios Gram negativos, los cuales tienen la particularidad de formar una simbiosis mutualista con plantas leguminosas. Presentan cápsula, poseen de uno a seis flagelos que pueden ser peritricales o subpolares, sus colonias son de color beige o blanco. Tienen la particularidad de infectar las raíces de las leguminosas y posteriormente formar nódulos. Durante el desarrollo del presente trabajo se aislaron cuatro sepas de Rhizobium, dos de las cuales se aislaron a partir de muestras de tierras provenientes de campos cultivados con soja, una se aisló a partir de tierras de campos cultivados con alfalfa, y la restante se aisló a partir de nódulos de una leguminosa del género Vicia sp. La identificación preliminar de las bacterias se llevó a cabo mediante coloración de Gram, determinándose además la presencia de flagelos y cápsula. La caracterización taxonómica se realizó por amplificación y secuenciación de los genes ADN 16s y gyrB. Por otro lado también se realizaron ensayos de restricción de los productos de amplificación (ARDRA) lo que permitió determinar similitudes entre los aislamientos caracterizados. La resistencia a los metales se realizó mediante ensayos cualitativos y semicuantitativos, en los cuales se usó cobre (Cu 2+) en concentraciones de 0.1 mM, 0.3 mM y 0.5 mM, cadmio (Cd 2+) a las concentraciones 10 ppm, 50 ppm y 100 ppm. Las cuatro cepas mostraron resistencia a todas las concentraciones de Cu 2+ ensayadas. Cabe destacar que todas las cepas fueron tolerantes a 10 ppm de Cd 2+, sin embargo a 50 ppm de Cd 2+ solo fueron tolerantes las cepas Alfa 1 y Soja 1, a 100 ppm de Cd 2+ las cuatro cepas fueron sensibles. Los resultados obtenidos contribuyen a soportar la hipótesis de utilizar de utilizar cepas de Rhizobium asociados con plantas en ensayos de biorremediación de suelos contaminados con metales pesados.