VACUNAS BASADAS EN EL DOMINIO CONSERVADO DE LA HEMAGLUTININA DEL VIRUS DE INFLUENZA A PROTEGEN FRENTE AL DESAFÍO LETAL EN UN MODELO DE RATÓN

CALDEVILLA CECILIA; PAREDES ROJAS YESICA; IBAÑEZ LORENA ITATÍ; MATTION NORA

Rosario, Santa Fe

Congreso; XXIII congreso Latinoamericano de Microbiología; 2016

La Hemaglutinina (HA) es una de las proteínas expuestas del virus de influenza, posee dos dominios diferenciados: globular ytallo. Se postula que la presencia del dominio globular inmunodominante, que es altamente variable, enmascara el dominio del tallo que está relativamente conservado, lo que dificulta la generación de anticuerpos con reactividadcruzada, es decir con capacidad para reconocer diferentes cepas del virus. El objetivo de este trabajo fue evaluar la capacidad de protección conferida por dos inmunógenos basados en la HA de la cepa A/Equi/Argentina/93 (H3N8) que contienen una deleción del dominio globular. Se generó una vacuna de subunidad proteica y una vacuna a ADN, y se realizaron ensayos de desafío. La cepa seleccionada para el desafío fue A/Victoria/3/75(H3N2), denominada en el laboratorio A/X47, que contiene una HA del mismo subtipo que el de las vacunas en estudio, aunque difiere en un 5% a nivel de aminoácidos. Esta cepa, de origen humano está adaptada a ratón. La cepa se amplificó en células MDCK y posteriormente se determinó la dosis letal 50% (DL50)previo al desafío.Se inmunizaron grupos de 9 ratones BALB/c con 3 dosis de 50 µg de ADN o 10 µg de proteína purificada por vía intramuscular o intraperitoneal, respectivamente. Un grupo de ratones recibió sólo proteína, otro sólo ADN, dos grupos recibieron combinaciones de ambas vacunas, un quinto grupo recibió una vacuna control quecontenía la HA completa y el último grupo recibió sólo PBS. Los animales fueron desafiados con 2 DL50 de la cepa antes mencionada, tres semanas después de la última inmunización. Los parámetros evaluados fueron el porcentaje de supervivencia, la pérdida de peso de los animales y título viralesen pulmones.  Se obtuvieron altos niveles de protección frente al desafío letal con la cepa heteróloga A/X47. Se observó un 80% de supervivencia en el grupo inmunizado con3 dosis de vacuna proteica y sólo 20% en el grupo que recibió la vacuna a ADN.En uno de los grupos combinados, que recibió inicialmente una dosis de proteína, la supervivencia fue del 100% mientras que en el grupo en que la proteína se inyectó sólo en la tercera dosis la supervivencia disminuyó al 60%.El grupo control positivo sobrevivió en un 100% y el grupo PBS no tuvo supervivientes. No se encontraron diferencias significativas en los títulos virales de ratones que recibieron las vacunas en estudio.Se concluye que vacunas basadas en la región conservada de la HA de la cepa A/Equi/Arg/93 tienen capacidad de protección frente al desafío con una cepa humana heteróloga. Este es un resultado alentador ya que esta vacuna podría proveer protección frente a otras cepas equinas H3 pertenecientes a distintos linajes, lo que permitiría en un futuro estar preparados para la prevención de posibles brotes ante el ingreso eventual de nuevas variantes.