INVESTIGADORES
IBAÑEZ Lorena Itati
congresos y reuniones científicas
Título:
ESTABLECIMIENTO DE UN SISTEMA DE GENÉTICA REVERSA PARA EL ESTUDIO DE UN VIRUS DE INFLUENZA A DE PERDIZ (Rhynchotus rufescens)
Autor/es:
PAREDES ROJAS YESICA ; CALDEVILLA CECILIA; MATIELLO ROSANA; MATTION NORA; IBAÑEZ LORENA ITATÍ
Lugar:
Chascomus, Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XV Jornadas Anuales de la Sociedad Argentina de Biología ?A 60 AÑOS DE LA DESCRIPCIÓN DE LA ESTRUCTURA DEL ADN?; 2013
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Biología
Resumen:
Objetivo:
En el año 2008 se aisló un virus de influenza H1N1 (A/red-winged
tinamou/Argentina/MP1/2008) que afectó a perdices en la provincia de Buenos
Aires. Las características moleculares de este virus no han sido estudiadas en
detalle. El objetivo de este trabajo fue obtener los 8 segmentos del virus por
genética reversa, con la intención de generar partículas virales infectivas que
permitan realizar estudios específicos de virología molecular y del
comportamiento biológico de esta cepa.
Métodos:
Se utilizó un método de genética reversa cuya primera reacción de PCR utiliza
primers que reconocen sitios conservados dentro de la secuencia no codificante
de cada gen. Los fragmentos obtenidos se utilizaron como megaprimers en una
segunda reacción de PCR, que luego fue tratada con la enzima DpnI y
transformada en bacterias DH5alfa. A partir de las colonias se extrajo ADN que
fue analizado por restricción con la enzima BglI.
Resultados:
Para el fragmento correspondiente a la HA se obtuvieron clones positivos que
tuvieron el patrón esperado luego del análisis por restricción. En el caso de
los fragmentos correspondientes a las proteínas NS, M, NP y NA se han obtenido
colonias las cuales se están analizando por restricción.
Conclusiones:
Se puso a punto el sistema de genética reversa para el clonado del virus de
influenza. Hasta el momento se ha podido obtener el plásmido que codifica para
la HA de perdiz. Se espera avanzar en la obtención de los demás fragmentos para
poder generar partículas virales infectivas que serán estudiadas por técnicas
de virología molecular.