Adsorción de proteínas antigénicas del T. cruzi sobre látex de poliestireno para detectar la enfermedad de chagas

GARCIA VALERIA; GONZALEZ VERONICA; VEGA JORGE; MARCIPAR IVAN; GUGLIOTTA LUIS

Viña de Mar

Simposio; IV Simposio Argentino Chileno de Polímeros; 2007

El uso de látex poliméricos en aplicaciones biomédicas es de gran interés, en particular en el desarrollo de reactivos de inmunodiagnóstico. La posibilidad de obtener látex de tamaño uniforme y funcionalidad deseada los convierte en soportes relevantes para los propósitos antedichos. Un inmunoensayo se basa en la reacción específica entre un antígeno (Ag) y un anticuerpo (Ac). Si cualquiera de ellos se encuentra soportado sobre la superficie de las partículas de un látex, entonces la reacción inmunológica se ve amplificada debido a la aglutinación de las partículas. Por lo tanto, con el uso de partículas de látex como portadoras de Ag o Ac, se pueden detectar gran variedad de enfermedades, dependiendo del Ag o Ac fijado. Las principales ventajas de este método de inmunodiagnóstico son su rapidez, bajo precio y la comodidad de poder visualizar los resultados por simple observación directa. Los látex de poliestireno (PS) han sido ampliamente estudiados en el campo de la biomedicina, debido a que la naturaleza hidrofóbica de los mismos, favorece la adsorción física de las proteínas. Singer y Plotz realizaron las primeras aplicaciones de los látex de PS en inmunoensayos. Desde entonces, se han realizado numerosos estudios sobre su síntesis (en ausencia o en presencia de emulsificante), el control del tamaño de partículas y sus propiedades superficiales, y su aplicación. Los principales problemas de estos sistemas de inmunodiagnóstico son: i) la sensibilidad, o cantidad mínima de Ag o Ac que son capaces de detectar, y ii) la inestabilidad coloidal. Esta última es un factor determinante de la calidad del kit de inmunodiagnóstico. La agregación de las partículas se puede producir por el aumento de la fuerza iónica del medio (I) o debido a la reacción inmunológica. Los complejos látex-proteína son bastante inestables en las condiciones fisiológicas que caracterizan al suero sanguíneo, y bajo las cuales se realizan los ensayos: I=150 mM y pH 7. Si la agregación se produce por baja estabilidad coloidal y no por presencia del Ac específico, entonces se obtiene un falso positivo. Por ello, es muy importante encontrar las condiciones que permitan estabilizar a los complejos coloidales. En este trabajo, que es continuación de otros previos, se considera la adsorción de varias proteínas antigénicas del T. cruzi sobre partículas de PS, para producir un reactivo capaz de detectar la Enfermedad de Chagas