Identificación molecular de hongos filamentosos productores de enzimas fibrinolíticas aislados de Las Yungas (Tucumán - Argentina)

JOSÉ I ROVATI; HIPÓLITO F. PAJOT; OSVALDO D. DELGADO; LUCÍA I.C. DE FIGUEROA; JULIA I. FARIÑA

Mar del Plata

Congreso; VI Congreso Latinoamericano de Micología; 2008

Sociedad Latinoamericana de Micología

La región de Las Yungas Andinas es una selva húmeda que se encuentra en sectores montañosos cercanos a la cadena de Los Andes. Se extiende desde Venezuela, Ecuador, Perú, Bolivia y llega al noroeste de la Argentina, abarcando la parte este de las provincias de Salta, Jujuy, Tucumán y Catamarca (Grau& Brown, 2000). Se trata de un ecosistema escasamente estudiado en la diversidadmicrobiológica y hallazgos e investigaciones de nuestro grupo de trabajo indican un gran potencial como fuente de aislamiento de microorganismos con distintas actividades enzimáticas de interés biotecnológico. El ciclo fibrinolítico es un importante sistema  fisiológico destinado a  limitar la formación de exceso de fibrina en los vasos sanguíneos  (Fig. 1). En la trombosis clínica, es posible activar el mecanismo lítico en forma exógena y, de tal manera, digerir grandes cantidades de fibrina in vivo.La administración de enzimas fibrinolíticas como la Urokinasa (UK) o la Estreptokinasa(SK) resulta efectiva, sin embargo su obtención es costosa y/o el producto final provoca efectos colaterales no deseados. Previamente, se realizó el screening correspondiente para determinar los aislamientos productores de enzimas con actividad fibrinolítica. De 219 aislamientos fúngicos testeados, sólo tres de ellos fueron capaces de producir enzimas fibrinolíticas. Para la identificación de hongos y levaduras el empleo de técnicas microbiológicas de asimilación de carbono, de compuestos nitrogenados y requerimientos vitamínicos, son las más comúnmente usadas, pero éstas no siempre son precisas ni reproducibles, principalmente debido a que las características morfológicas y fisiológicas están fuertemente influenciadas por las condiciones de cultivo. Por esta razón, se recurre a técnicas moleculares, ya que combinan exactitud y rapidez en la identificación de microorganismos. El LSU (subunidad mayor del ribosoma) es parte del complejo de genes del rDNAy esta constituido por secuencias repetidas en tandem, organizándose en grupos los genes ribosomalesen el genoma nuclear. Los genes ribosomalesson altamente conservados, actualmente se sabe que están compuestos de una mezcla de regiones conservadas y divergentes, éstas últimas son llamadas “regiones divergentes -D”y tienen una orientación que va de 5’a 3’del rRNAmaduro (Sonnenberg, 2007). La secuenciación de esta región permite un reconocimiento intraespecíficoentre distintas especies de hongos y levaduras.