Actividad y expresión de isoformas de carboxilesterasa y paraoxonasa en placenta y trofoblastos HTR-8SV/neo humanos: efectos de la exposición a clorpirifos

RODRIGUEZ, PIUQUE MIGUEL; BERTA VERA; LOSILLA, VANESA; MUNTANER CELESTE; MIGLIORANZA KARINA; ONDARZA PAOLA; GUIÑAZU ALANIZ, NATALIA LORENA

Buenos Aires

Congreso; XXII Congreso Argentino de Toxicología; 2021

Asociacion Toxicologica Argentina

En el Alto Valle de Rio Negro y Neuquén para controlar los insectos plaga se utilizan numerosos plaguicidas, como los insecticidas organofosforados (OF). Estos se metabolizan al oxón responsable de la inhibición de esterasas. Estas enzimas muestran diferencias en su interacción con OF, al contrario de carboxilesterasa (CES), paraoxonasa (PON) no es inhibida por el oxón, mientras que ambas detoxifican OF. Los objetivos fueron investigar cambios en la actividad y expresión de CES y PON en mujeres residentes del Alto Valle, y determinar la respuesta de células HTR-8SV/neo de trofoblasto humano a la exposición in vitro al OF clorpirifos (CP).Se colectaron placentas de 61 mujeres embarazadas sanas, durante 2018-2020. Se realizó un estudio de corte transversal, se utilizaron criterios de inclusión/exclusión y se obtuvo el consentimiento informado y muestras de placenta, luego de la cesárea a término. Se completó un cuestionario con las características sociodemográficas de las madres y los parámetros antropométricos del neonato. Las muestras fueron clasificadas según lugar de residencia en rurales (R=28) y urbanas (U=33). En la placenta se analizó el nivel de CP (ng/g lípido) por GC-ECD. Se determinó la actividad de CES y PON por los métodos de Dary y Schrader, respectivamentey la expresión de las isoformas PON1, PON2, PON3 y CES1, CES2, CES3 por PCR cuantitativa. Además, en cultivo celular se investigó el efecto de la exposición in vitro a CP (0,01; 0,1; 1 y 10 µM) por 24 h, sobre la actividad y expresión de CES en la línea celular HTR-8SV/neo.La concentración de CP (mediana ± DS; ng/g lip) en U (79,80 ± 210,6) vs R (39,72 ± 34,49) no mostró diferencias significativas (Mann Whitney; p=0,2539). Los parámetros sociodemográficos y antropométricos no arrojaron cambios significativos entre ambos grupos. Se observó una inhibición significativa de la actividad de CES (mediana ± DS; nmol/min.mg prot) en las muestras R (162,6 ± 28,79) respecto de U (192,9 ± 25,92) (M. W.; p=0,0008). La actividad de PON no mostró cambios significativos entre grupos (M. W.; p=0,2088). Se demostró la expresión del mensajero de PON2 y CES2 aunque no se observaron cambios en U vs R. La exposición de las células HTR-8SV/neo a CP disminuyó significativamente la actividad de CES respecto al control en un 20,56% a 1 µM y 19,42% a 10 µM (Kruskal-Wallis; p