Análisis de variabilidad de los genes p27 (dCP) y p25 (CP) entre aislamientos argentinos de CTV (cítrus tristeza virus)

GAGO-ZACHERT, SELMA P.; ROBLEDO, GERMÁN; COSTA, NORMA; GRAU, OSCAR; SEMORILE, LILIANA C.

Buenos Aires

Congreso; VI Congreso Argentino de Virología; 1999

Sociedad Argentina de Virología

Los aislamientos de CTV son poblaciones complejas de RNAs genómicos y defectivos que varían ampliamente en sus características biológicas. El genoma de CTV es un RNA (+) de 19300 nt. Encapsidado en partículas alargadas y flexuosas con dos proteínas de cubierta, una de 25 kDa (CP), que cubre un 25 % de la partícula y una copia divergente de la anterior, de 27 kDa (dCP), que cubre un extremo de la misma, formando una estructura tipo serpiente de cascabel. El análisis del polimorfismo de conformación de DNA monocatenario (SSCP) permite detectar diferencias nucleotídicas en ssDNA por medio de PAGE no desnaturalizante. Esta técnica se aplico a la evaluación de heterogeneidad de secuencia de los genes p27 (dCP) y p25 (CP) de aislamientos de diferentes orígenes geográficos y hospedadores cítricos y se caracterizaron biológicamente por inoculación en plantas indicadoras. Para cada aislamiento, se obtuvo el cDNA de ambos genes por trascripción reversa con el mismo primer 3´, se amplificaron por PCR y luego del clonado se analizaron 10 clones de cada uno. Los resultados obtenidos permiten realizar tres observaciones: i) el gen p27 (dCP) mostró mayor heterogeneidad que el gen p25 (CP), sugiriendo que una presión selectiva diferente esta actuando en su evolución, ii) la estructura de la población viral para ambos genes resultó mas homogénea en los aislamientos de pomelo que en los de naranjo y iii) en los dos aislamientos mas severos de pomelo, p27 resultó sumamente homogéneo.