Actividades biológicas del fragmento DC obtenido por autólisis de una SVMP-PIII del veneno de Bothrops alternatus

VAN DE VELDE, ANDREA C.; BUSTILLO SOLEDAD; GAY CLAUDIA C.

Resistencia

Congreso; XXI Reunión de Comunicaciones Científicas y Tecnológicas. Edición 2015; 2015

Universidad Nacional del Nordeste

Los venenos de serpientes comprenden una mezcla compleja de proteínas que inducen una amplia variedad de efectos en sus presas y víctimas humanas. B. alternatus es una especie de gran importancia médica en la nordeste, ya que es una de las principales causantes de accidentes por ofidios. Entre las principales toxinas aisladas y caracterizadas de este veneno, las Metaloproteinasas de Venenos de Serpientes (SVMPs, siglas en inglés) son las responsables de inducir hemorragia, proteólisis, mionecrosis, inflamación, alteración de la hemostasia, entre otras actividades. Estas enzimas constituyen el 43,10% de los componentes del veneno de B. alternatus. Estas proteínas pueden sufrir, bajo determinadas condiciones, un fenómeno de autólisis in vitro liberando fragmentos que presentan actividades vinculadas a desintegrinas. A partir del veneno de B. alternatus se aisló y caracterizó una SVMP PIII, baltergina, la cual es capaz de generar productos de autólisis. En el presente trabajo, el objetivo fue estudiar los efectos biológicos de uno de los productos estables obtenidos por procesamiento autoproteolítico de baltergina, sobre la agregación plaquetaria y la adhesión de células endoteliales. Se comprobó que el fragmento indujo una inhibición de la agregación plaquetaria de manera dosis dependiente, observándose una inhibición del 43,65% con 50 µg/ml de fragmento. Los resultados de los ensayos de adhesión permitieron comprobar un efecto inhibitorio del fragmento sobre la adherencia de células endoteliales de la línea t-End. La disminución en el porcentaje de adherencia celular fue proporcional a las dosis ensayadas, observando solo un 50% de adherencia con respecto al control cuando se incubaron las células con la mayor concentración del fragmento evaluada (50µg/mL). Ambos resultados ponen en evidencia la capacidad del fragmento de interferir en los procesos, probablemente por interacción con integrinas de membrana celulares. Asimismo, los resultados permiten profundizar en el conocimiento del proceso proteolítico de las SVMPs, y a la vez contar con un fragmento estable, vinculado a desintegrinas, con actividad biológica y de menor toxicidad que la enzima nativa. Futuros estudios tendrán por objetivo la purificación, por métodos cromatográficos y en presencia del agente reductor, del fragmento DC de 30 kDa y evaluar su potencial acción farmacológica como anti-metastásico.